English
Kontaminácia mykoplazmami je veľmi častým problémom pri kultivácii buniek v bunkové továrne. Na rozdiel od iných kontaminácií sa mykoplazmou kontaminované bunky vo všeobecnosti nezakaľujú, takže je ťažké to posúdiť voľným okom. Existujú štyri spôsoby, ako určiť, či sú bunky kontaminované mykoplazmou:
1. Fluorescenčné farbenie DNA Metóda fluorescenčného farbenia DNA je založená na princípe, že fluorescenčné farbivo Hoechst33258 sa môže viazať na oblasť bohatú na AT bázy v DNA mykoplazmy. Fluorescenčné bodky sú mykoplazmová DNA bohatá na oblasti báz AT.
2. Technológia PCR Špecifické priméry sú navrhnuté podľa konzervovaných sekvencií v genóme Mycoplasma, amplifikuje sa nukleová kyselina vzorky, ktorá sa má testovať, a diagnóza sa robí analýzou veľkosti amplifikovaného produktu. Technológia detekcie PCR sa používa na detekciu kontaminácie mykoplazmami, s krátkym cyklom, vysokou citlivosťou, dobrou špecifickosťou, jednoduchou obsluhou a dokáže detegovať veľké množstvo vzoriek naraz.
3. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)
ELISA sa používa na detekciu kontaminácie mykoplazmami s dobrou špecifickosťou a citlivosťou a môže dokončiť detekciu veľkého počtu vzoriek naraz. Má vlastnosti jednoduchej, rýchlej a kvantitatívnej kvalitatívnej detekcie.
4. Elektrónový mikroskop Vo všeobecnosti sa bunky v bunkových továrňach kultivujú 48 až 72 hodín. Predtým, ako sa bunky takmer zlúčia, sú bunky štiepené trypsínom, aby sa vytvorila bunková suspenzia, fixovaná, zapustená a narezaná pred pozorovaním. Vyššie uvedené sú štyri bežne používané metódy detekcie pri detekcii mykoplazmovej kontaminácie v bunkových továrňach. V súčasnosti je známych viac ako 20 druhov mykoplazmy, ktoré kontaminujú bunky, z ktorých viac ako 95 % tvoria mykoplazmy ústnej dutiny, takže operátori by mali pri kultivácii buniek dbať na aseptickú prevádzku.
ELISA is used in the detection of mycoplasma contamination, with good specificity and sensitivity, and can complete the detection of a large number of samples at one time. It has the characteristics of simple, rapid and quantitative qualitative detection.
4. Electron microscope
Generally, cells in cell factories are cultured for 48 to 72 hours. Before the cells are nearly confluent, the cells are digested with trypsin to make a cell suspension, fixed, embedded, and sliced before observation.
The above are four commonly used detection methods when detecting mycoplasma contamination in cell factories. At present, there are more than 20 kinds of mycoplasma known to contaminate cells, of which more than 95% are oral mycoplasma, so operators should pay attention to aseptic operation when culturing cells.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.