Detekcia aktivity buniek v bunkových továrňach - metóda MTT

Wed May 18 13:01:29 CST 2022

je spotrebný materiál, ktorý sa často používa na kultiváciu adherentných buniek. Počas experimentu musíme zachytiť rastový stav buniek v reálnom čase a vykonať príslušné úpravy podľa konkrétnej situácie. Životaschopnosť buniek môže byť detekovaná metódou MTT na stanovenie bunkového rastu. MTT metóda, tiež známa ako MTT kolorimetrická metóda, je metóda na detekciu prežitia a rastu buniek. Princíp detekcie spočíva v tom, že sukcinátdehydrogenáza v mitochondriách živých buniek môže redukovať exogénny MTT na vo vode nerozpustný modrofialový kryštalický formazan a ukladať sa v bunkách, zatiaľ čo mŕtve bunky takúto funkciu nemajú. Dimetylsulfoxid (DMSO) môže rozpúšťať formazan v bunkách a jeho hodnota absorpcie svetla sa môže merať pomocou enzýmového imunosorbentového testu pri vlnovej dĺžke 570 nm, čo môže nepriamo odrážať počet živých buniek. V určitom rozsahu počtu buniek je množstvo tvorby kryštálov MTT úmerné počtu buniek. Táto metóda je široko používaná pri detekcii aktivity niektorých biologicky aktívnych faktorov, vo veľkom meradle skríningu protinádorových liečiv, teste cytotoxicity a teste rádiosenzitivity nádoru. Vyznačuje sa vysokou citlivosťou a hospodárnosťou.cell factory

Pred testovaním životaschopnosti buniek v bunkovej továrni je veľmi dôležitým krokom formulácia MTT. Typicky je koncentrácia MTT pri tejto metóde 5 mg/ml. Preto je možné odvážiť 0,5 g MTT, rozpustiť v 100 ml fosfátom pufrovaného fyziologického roztoku (PBS) alebo média bez fenolovej červene, prefiltrovať pomocou 0,22 μm filtra, aby sa odstránili baktérie v roztoku, a uložiť pri 4 °C v tme. . . Počas prípravy a skladovania sa snažte obal zabaliť do hliníkovej fólie.

Pri použití metódy MTT na meranie bunkovej aktivity v bunkovej továrni je potrebné poznamenať, že MTT je karcinogénny, preto buďte pri jeho používaní opatrní. Táto metóda sa môže použiť len na detekciu relatívneho počtu buniek a relatívnej životaschopnosti, ale nie absolútneho počtu buniek. Pri testovaní výsledkov pomocou čítačky mikrodoštičiek, aby sa zabezpečila linearita experimentálnych výsledkov, by mala byť absorbancia MTT čo najviac v rozsahu 0-0,7.

When using the MTT method to measure the cell activity in the cell factory, it should be noted that MTT is carcinogenic, so be careful when using it. This method can only be used to detect relative cell number and relative viability, but not absolute cell number. When testing the results with a microplate reader, in order to ensure the linearity of the experimental results, the MTT absorbance should be in the range of 0-0.7 as much as possible.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.