Ứng dụng của bình nuôi cấy tế bào trong thí nghiệm ly giải tế bào

Wed May 18 13:47:43 CST 2022

Ly giải tế bào là một phương pháp thực nghiệm quan trọng để thay đổi tính thấm và hoạt tính của tế bào. Có nghĩa là sau khi một tế bào bị nhiễm virut, virut sẽ sử dụng chất dinh dưỡng trong tế bào chủ để tổng hợp nên các con của chính nó, sau đó các con của virut sẽ phá hủy tế bào chủ và bị thải ra khỏi tế bào. Trong các thí nghiệm ly giải tế bào, là vật tư tiêu hao phổ biến. Các bước ly giải tế bào như sau: Bình nuôi cấy tế bào

1. Đổ môi trường nuôi cấy ra, và úp ngược nắp chai nuôi cấy tế bào lên giấy thấm để giấy thấm hút hết môi trường nuôi cấy (hoặc đặt chai thẳng đứng một lúc để môi trường nuôi cấy dư chảy xuống đáy chai. rồi dùng pipet hút đi).

2. Thêm 3ml PBS 4 ℃ đã làm lạnh trước (0,01M pH7,2 7,3) vào mỗi lọ tế bào. Đặt các tế bào nằm phẳng và lắc nhẹ trong 1 phút để rửa các tế bào, sau đó loại bỏ dung dịch rửa. Lặp lại thao tác trên hai lần, rửa tế bào ba lần để rửa trôi dịch nuôi cấy. Loại bỏ PBS và đặt bình nuôi cấy trên đá.

3. Thêm 10ul PMSF (100mM) vào 1ml đệm ly giải, lắc kỹ và đặt trên đá. (PMSF phải được lắc cho đến khi không còn tinh thể trước khi trộn với dung dịch ly giải.)

Application of cell culture flask in cell lysis experiment

4. Thêm 400ul dung dịch đệm ly giải có chứa PMSF vào mỗi bình tế bào, và để lạnh trên đá trong 30 phút. Để đông lạnh hoàn toàn các tế bào, bình phải được lắc thường xuyên.

5. Sau khi ly giải, dùng cạp sạch để cạo tế bào trên một mặt của bình nuôi cấy (thao tác phải nhanh), sau đó dùng súng để di chuyển mảnh vụn tế bào và dịch ly sang ống ly tâm 1,5ml. (Toàn bộ hoạt động nên được thực hiện trên đá càng nhiều càng tốt.)

6. Ly tâm ở 12000 vòng / phút ở 4 ° C trong 5 phút. (Bật máy ly tâm trước để làm mát trước)

7. Chuyển phần nổi phía trên đã ly tâm vào ống ly tâm trong 0,5 phút và bảo quản ở -20 ° C. , Tế bào HEK 293, tế bào CAR-T, tế bào CHO, tế bào côn trùng, v.v.

Cell culture flasks Bình nuôi cấy tế bào

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.