E. coli koloniyalarini aniqlash uchun hujayra madaniyati kolbalaridan qanday foydalanish kerak

Wed May 18 15:30:28 CST 2022

Koliform bakteriyalar laktoza fermenti, kislota va gaz, aerob va fakultativ anaerob ishlab chiqarishi mumkin bo'lgan gram-manfiy bakteriya bo'lmagan bakteriyalar guruhiga kiradi. Amaliy ilovalarda u ko'pincha oziq-ovqatning najas bilan ifloslanganligini ko'rsatadigan ko'rsatkich sifatida ishlatiladi. Barcha aniqlash usullari orasida aniqlash uchun hujayra kulturalari dan foydalanish ko'proq qo'llaniladi. Operatsiya bosqichlari quyidagicha:

1. Namuna olish va suyultirish

(1) Aseptik usulga muvofiq, 25 g (yoki 25 ml) sinov namunasini 225 ml steril suv (kolbadagi tegishli miqdordagi shisha boncuklar) yoki sterillangan ohak solingan hujayra madaniyati kolbasiga soling, va yaxshilab silkiting. Yoki 1:10 nisbatda bir xil suyultirish uchun maydalang. Qattiq namunalar uchun steril gomogenizatordan foydalanish va 1:10 nisbatda suyultirish uchun 1 daqiqa davomida 800010000r/min tezlikda santrifüj qilish yaxshidir.

(2) 1ml steril somondan foydalaning. 1 ml 1:10 seyreltme so'rish uchun, uni 9 ml steril suv solingan probirkaga quying, silkitib, 1:100 suyultirish uchun aralashtiring, 1 ml steril somon bilan almashtiring, bosing Yuqoridagi operatsiyalar ketma-ket 10 marta ketma-ket suyultirishlar amalga oshiriladi. .

(3) Oziq-ovqat gigienasi talablariga yoki sinov namunalarining ifloslanishini baholashga ko'ra, uchta suyultirishni tanlang va har bir suyultirish uchun 3 ta naychani emlang. Shuningdek, uni to'g'ridan-to'g'ri namuna bilan emlash mumkin.

2. Laktozaning dastlabki fermentatsiya testi

Bu odatda gipotetik test deb ataladi. Uning maqsadi gaz hosil qilish uchun laktoza fermenti qilgan bakteriyalar uchun namunani tekshirishdir. Tekshiriladigan namuna laktoza o't tuzi fermentatsiya trubkasiga emlanadi, qo'sh laktoza safro tuzi fermentatsiya trubkasi 1 ml dan yuqori emlash uchun ishlatiladi; bitta laktoza safro tuzining fermentatsiya trubkasi 1 ml va 1 ml dan kamroq uchun ishlatiladi. Har bir suyultirish uchun 3 ta naychani inokulyatsiya qiling va ularni 36±1℃ inkubatorga 24±2 soat davomida joylashtiring. Agar barcha laktoza o't tuzi fermentatsiya naychalari gaz hosil qilmasa, bu koliform bakteriyalar uchun salbiy deb xabar qilinishi mumkin. Agar gaz hosil bo'lsa, quyidagi tartibni bajaring.

3. Ajratish madaniyati

Gaz hosil qiluvchi fermentatsiya naychalari yoʻl-yoʻl qoʻyildi va eozin-metilen koʻk agar plastinkalariga emlandi va 18-24 soat davomida 36±1°C da inkubatorda yetishtirildi. Keyin koloniya morfologiyasi kuzatildi va Gram bo'yash, mikroskopik tekshirish va qayta fermentatsiya testi o'tkazildi.

How to use cell culture flasks to detect E. coli colonies

4. Laktozani ikki marta fermentatsiya qilish testi

Tasdiqlash testi deb ataladi, uning maqsadi sinov naychasidan ajratilgan gram-manfiy bakteriya bo'lmagan bakteriya laktoza fermentatsiyasining dastlabki sinovida ijobiy bo'lgan laktozani gaz hosil qilish uchun haqiqatan ham fermentatsiyalashi mumkinligini isbotlashdir. Yuqorida aytib o'tilgan selektiv EMB muhitida Gram bo'yash uchun 1 dan 2 gacha shubhali koliform koloniyalarni tanlang va bir vaqtning o'zida laktoza fermentatsiya naychalarini emlang va gazni kuzatish uchun ularni 36 ± l ° C inkubatorga 24 ± 2 soat davomida joylashtiring. ishlab chiqarish. . Laktoza fermentatsiya trubkasi gaz hosil qiladigan va grammli dog 'salbiy bo'lsa, Bacillussiz bakteriyalar koliformlar uchun ijobiy deb xabar qilinadi; laktoza fermentatsiya trubkasi gaz hosil qilmasa yoki grammli dog 'musbat bo'lsa, u koliformlar uchun salbiy deb xabar qilinadi.

Yuqorida E. coli guruhi ko'rsatkichlarini aniqlash uchun hujayra madaniyati kolbalari dan foydalanishning operatsiya usuli hisoblanadi. Escherichia coli oziq-ovqatning ifloslanganligini ko'rsatadigan muhim ko'rsatkichdir. Aniqlash usulini o'zlashtirish har bir oziq-ovqat inspektori ega bo'lishi kerak bo'lgan asosiy ko'nikma hisoblanadi.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.