Як використовувати колби для культури клітин для виявлення колоній E. coli

Wed May 18 13:59:29 CST 2022

Коліформні бактерії відносяться до групи грамнегативних не палочкових бактерій, які можуть ферментувати лактозу, виробляти кислоту і газ, аеробні та факультативно-анаеробні. У практичному застосуванні він часто використовується як індикатор того, чи забруднена їжа фекаліями. Серед усіх методів виявлення найбільш поширеним є використання колби для культури клітин для виявлення. Етапи роботи такі:

1. Відбір проб і розведення

(1) Відповідно до асептичного методу, помістіть 25 г (або 25 мл) досліджуваного зразка в колбу для культури клітин, що містить 225 мл стерильної води (заздалегідь встановлена ​​відповідна кількість скляних кульок у колбі) або стерилізовану ступку, і ретельно струсіть. Або подрібніть до однорідного розведення 1:10. Найкраще використовувати стерильний гомогенізатор для твердих зразків і центрифугувати зі швидкістю 800010000 об/хв протягом 1 хвилини, щоб зробити розведення 1:10.

(2) Використовуйте стерильну соломинку 1 мл щоб відсмоктати 1 мл розведення 1:10, налийте його в пробірку з 9 мл стерильної води, струсіть і перемішайте, щоб отримати розведення 1:100, замініть стерильною соломинкою 1 мл, натисніть. .

(3) Відповідно до вимог гігієни харчових продуктів або оцінки забруднення досліджуваних зразків виберіть три розведення та засійте 3 пробірки для кожного розведення. Його також можна інокулювати безпосередньо зразком.

2. Початковий тест на ферментацію лактози

Це зазвичай називають гіпотетичним тестуванням. Його мета — перевірити зразок на наявність бактерій, які ферментують лактозу з утворенням газу. Зразок, що підлягає випробуванню, засівають у пробірку для ферментації жовчної солі лактози, подвійну пробірку для ферментації жовчної солі лактози використовують для посіву понад 1 мл; одна пробірка для ферментації жовчної солі лактози використовується для 1 мл і менше 1 мл. Засійте 3 пробірки для кожного розведення і помістіть їх в інкубатор при 36±1℃ на 24±2 години. Якщо всі пробірки для ферментації жовчної солі лактози не виробляють газ, це можна повідомити як негативне для бактерій кишкової палички. Якщо виділяється газ, виконайте наведену нижче процедуру.

3. Сепараційна культура

Пробірки для ферментації, що утворюють газ, були нанесені смугами та посівами на чашки з еозином з метиленовим синім агаром і культивовані в інкубаторі при 36±1°C протягом 18-24 годин. Потім спостерігали за морфологією колонії та проводили фарбування за Грамом, мікроскопічне дослідження та тест на повторну ферментацію.

How to use cell culture flasks to detect E. coli colonies

4. Тест на подвійну ферментацію лактози

Так званий тест підтвердження, мета якого полягає в тому, щоб довести, що грамнегативні бактерії без палички, виділені з пробірки, які були позитивними в початковому тесті на ферментацію лактози, дійсно можуть ферментувати лактозу з утворенням газу. На вищезгаданому селективному середовищі EMB відберіть від 1 до 2 підозрілих колоній кишкової палички для фарбування за Грамом, інокулюйте пробірки для ферментації лактози одночасно і помістіть їх в інкубатор при 36±l°C на 24±2 години для спостереження за газом. виробництво. . Якщо пробірка для ферментації лактози утворює газ, а пляма за Грамом негативна, бактерії, вільні від Bacillus, вважаються позитивними для коліформної палички; якщо пробірка для ферментації лактози не виділяє газ або пляма за Грамом є позитивною, це повідомляється як негативне для кишкової палички.

Наведений вище метод роботи з використанням колби для культури клітин для виявлення індикаторів групи E. coli. Кишкова паличка є важливим індикатором, який відображає, чи є харчові продукти забруднені. Оволодіння методом виявлення є основним навиком, яким повинен володіти кожен харчовий інспектор.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.