Як контролювати час перетравлення трипсину в колбах для культури клітин

Wed May 18 13:59:01 CST 2022

Культура клітин включає інокуляцію клітин, культивування, збирання та інші процеси. Клітини в колби для культури клітин виросли до певної міри, і клітини потрібно зібрати. У цей час клітини на стінці колби необхідно перетравити трипсином, а потім зібрати. Під час використання панкреатину необхідно контролювати час перетравлення.

Трипсин є гетерогенною протеазою, яка може руйнувати білок на клітинній мембрані та колбах для клітинної культури. При руйнуванні білка в певному місці відбувається деградація білка на стику між білками, і клітини стають сферичними через натяг внутрішнього цитоскелета, тим самим відокремлюючи клітини. Ступінь перетравлення трипсину є ключовим етапом у культурі клітин: збільшується надмірно перетравлений клітинний сміття, збільшується чорний накип, клітини розпадаються на частини, що серйозно впливає на життєздатність клітин, а деякі клітини плавають і втрачають з викинутим трипсином; травлення Недостатнє, клітини важко здути зі стінки пляшки, багаторазове піпетування також пошкодить життєздатність клітин.

How to control the digestion time of trypsin in the cell culture flasks

Різні тканини або клітини по-різному реагують на дію панкреатину. Активність дисперсних клітин панкреатину також пов’язана з його концентрацією, температурою та часом дії. При рН 8,0 і температурі 37 дія розчину панкреатину є відносно сильною. Під час використання панкреатину слід контролювати концентрацію, температуру та час, щоб уникнути пошкодження клітин, спричиненого надмірним перетравленням. Оскільки Ca2+, Mg2+, сироватка та білок можуть знижувати активність панкреатину, BSS без Ca2+ та Mg2+ слід використовувати для приготування розчину панкреатину, такого як розчин D-Хенкса. Припиняючи травлення, використовуйте культуральне середовище, що містить сироватку, або інгібітор трипсину, щоб зупинити дію панкреатину на клітини.

Крім того, якщо це нещодавно придбана клітина, ви можете спочатку використовувати низьку концентрацію трипсину, щоб з’ясувати перетравлення часу, і спостерігайте, чи круглі клітини щохвилини, і запишіть. Коротше кажучи, під час збирання клітин у колби для культури клітин необхідно контролювати час перетравлення трипсину, щоб підтримувати життєздатність клітин.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.