Застосування колб для культури клітин у пасажі клітин

Wed May 18 13:57:34 CST 2022

Клітинна культуральна колбамають пряму шию, кривошею, кутову шию, трикутник, прямокутник тощо відповідно до різних форм. Специфікації включають 25 мл, 75 мл, 175 мл і 250 мл. Менші розміри здебільшого використовуються для пасажу клітин, збереження клітин, надання клітин для експериментів тощо.

Після того, як клітини виростають у щільний моношар у колбі для культури клітин, вони в основному насичений. Для того, щоб клітини могли продовжувати рости і збільшувати кількість клітин, їх необхідно перекультивувати (повторно культивувати). Субкультура також є способом збереження видів клітин. У той же час це необхідний процес для різноманітних експериментів із використанням культивованих клітин. Підвішені клітини можна відокремити безпосередньо, тоді як адгезивні клітини необхідно перетравити, перш ніж їх можна буде розділити. Конкретні кроки такі:

1. Викиньте вихідне культуральне середовище в колбу для культури клітин, наповнену клітинами.

2. Додайте 0,5-1 мл 0,25% розчину панкреатину, щоб клітини на дні пляшки були занурені в розчин.

Application of cell culture flasks in cell passage

3. Надіньте на пляшку гумову пробку і помістіть її під перевернутий мікроскоп, щоб спостерігати за клітинами. З плином часу початкові прилиплі клітини поступово мали тенденцію бути круглими, і панкреатин відкидали, коли клітини ще не спливли, і додавали 10 мл культурального середовища для припинення травлення. Спостереження за травленням можна проводити також неозброєним оком. Коли дно пляшки стане білим і з’являться дрібні дірочки, травлення можна припинити. Зазвичай час перетравлення при кімнатній температурі становить приблизно 1-3 хвилини.

4. Використовуйте піпетку, щоб продути прилиплі клітини в суспензію, розділіть їх на дві-три пляшки, закрийте культуральний розчин гумовою пробкою і помістіть його при 37°C для продовження культивування. Спостерігайте за зростанням спайок наступного дня.

Вище описано застосування колби для культури клітин при пасажі клітин. Спосіб приготування розчину для травлення полягає в наступному: зважують 0,25 г трипсину (активність 1:250), додають 100 мл розчину Хенка без кальцію, Mg2+ для розчинення, фільтрують, стерилізують фільтрацією, зберігають при 4°C і повертають до температури 37 °C перед використанням. ЕДТА також можна додати до розчину панкреатину, щоб кінцева концентрація досягла 0,02%.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.