E. coli kolonilerini tespit etmek için hücre kültürü şişeleri nasıl kullanılır?

Thu May 19 08:59:40 CST 2022

Koliform bakteriler, laktozu fermente edebilen, asit ve gaz, aerobik ve fakültatif anaerobik üretebilen bir grup gram negatif basil olmayan bakteriyi ifade eder. Pratik uygulamalarda, genellikle yiyeceklerin dışkı ile kontamine olup olmadığının bir göstergesi olarak kullanılır. Tüm tespit yöntemleri arasında, tespit için hücre kültürü şişeleri kullanımı en yaygın kullanılanıdır. İşlem adımları aşağıdaki gibidir:

1. Örnekleme ve seyreltme

(1) Aseptik yönteme göre, 25 g (veya 25 mL) test örneğini, 225 mL steril su (şişede önceden ayarlanmış uygun sayıda cam boncuk) veya sterilize edilmiş bir harca içeren bir hücre kültürü şişesine koyun, ve iyice çalkalayın. Veya 1:10'luk tek tip bir seyreltme yapmak için öğütün. Katı numuneler için steril bir homojenizatör kullanmak ve 1:10 seyreltme yapmak için 800010000r/dk hızında 1 dakika santrifüj kullanmak en iyisidir.

(2) 1 mL steril pipet kullanın 1 Ml 1:10 dilüsyonu emmek için, 9mL steril su içeren bir test tüpüne dökün, çalkalayın ve 1:100 dilüsyon yapacak şekilde karıştırın, 1mL steril pipet ile değiştirin, basın Yukarıdaki işlemler art arda 10 kez seri dilüsyonlar yapılır. .

(3) Gıda hijyeni gereksinimlerine veya test numunelerinin kontaminasyon tahminine göre, üç dilüsyon seçin ve her dilüsyon için 3 tüp aşılayın. Ayrıca doğrudan numune ile aşılanabilir.

2. Laktozun ilk fermentasyon testi Bu genellikle varsayımsal test olarak adlandırılır. Amacı, gaz üretmek için laktozu fermente eden bakteriler için numuneyi kontrol etmektir. Test edilecek numune laktoz safra tuzu fermantasyon tüpüne aşılanır, çift laktoz safra tuzu fermantasyon tüpü 1 mL'nin üzerindeki aşılama için kullanılır; tek laktoz safra tuzu fermantasyon tüpü 1 mL ve 1 mL'den az için kullanılır. Her seyreltme için 3 tüp aşılayın ve bunları 24±2 saat 36±1℃ inkübatöre yerleştirin. Tüm laktoz safra tuzu fermantasyon tüpleri gaz üretmiyorsa koliform bakteri için negatif olarak rapor edilebilir. Gaz üretimi varsa, aşağıdaki prosedürü izleyin.

3. Ayırma kültürü

Gaz üreten fermentasyon tüplerine sürme yöntemi uygulandı ve eozin metilen mavisi agar plakaları üzerine aşılandı ve 18-24 saat boyunca 36±1°C'de bir inkübatörde kültürlendi. Daha sonra koloni morfolojisi gözlemlendi ve Gram boyama, mikroskobik inceleme ve yeniden fermantasyon testi yapıldı.

4. Laktoz çift fermentasyon testi

How to use cell culture flasks to detect E. coli colonies

İlk laktoz fermantasyon testinde pozitif olan test tüpünden izole edilen gram negatif basil olmayan bakterilerin gerçekten de gaz üretmek için laktozu fermente edebildiğini kanıtlamak olan sözde doğrulama testi. Yukarıda belirtilen seçici EMB besiyerinde, Gram boyama için 1 ila 2 şüpheli koliform kolonisi seçin ve aynı anda laktoz fermentasyon tüplerini inoküle edin ve gazı gözlemlemek için 24±2 saat boyunca 36±l°C'lik bir inkübatöre koyun. üretme. . Laktoz fermentasyon tüpünün gaz ürettiği ve gram boyamanın negatif olduğu durumlarda, Bacillus içermeyen bakteriler koliformlar için pozitif olarak rapor edilir; laktoz fermantasyon tüpünün gaz üretmediği veya gram boyamanın pozitif olduğu durumlarda, koliformlar için negatif olarak rapor edilir.

Yukarıdaki, E. coli grup göstergelerini saptamak için

kullanmanın çalışma yöntemidir. Escherichia coli, gıdanın kontamine olup olmadığını yansıtan önemli bir göstergedir. Tespit yönteminde uzmanlaşmak, her gıda denetçisinin sahip olması gereken temel bir beceridir.cell culture flaskshücre kültürü şişeleri

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.