ให้ความสนใจกับสามจุดนี้เมื่อใช้ขวดเพาะเลี้ยงเซลล์

Thu May 19 10:05:26 CST 2022

เป็นเซลล์สิ้นเปลืองชนิดหนึ่งที่ใช้ในการค้นคว้าและฝึกฝนชีวิต ส่วนใหญ่จะใช้สำหรับการเพาะปลูกเซลล์สมัครพรรคพวก ระหว่างการใช้งาน วิธีดำเนินการที่ถูกต้องเป็นข้อกำหนดเบื้องต้นเพื่อให้แน่ใจว่าการทดสอบจะดำเนินไปอย่างราบรื่น ให้ความสนใจกับสิ่งต่อไปนี้เมื่อใช้วัสดุสิ้นเปลืองนี้ กี่โมงแล้ว:1. เกี่ยวกับฝาปิด: อย่าปิดฝาขวดเพาะเลี้ยงเซลล์แบบใช้แล้วทิ้งแน่นเกินไปเพื่อให้แน่ใจว่ามีการแลกเปลี่ยนแก๊ส HEPES เป็นบัฟเฟอร์แบบไม่มีอิออนซึ่งมีความสามารถในการบัฟเฟอร์ที่ดีในช่วง pH 7.2-7.4 แต่มีราคาแพงมากและอาจเป็นพิษต่อเซลล์บางเซลล์ที่ความเข้มข้นสูง บัฟเฟอร์ HEPES สามารถใช้กับโซเดียมคาร์บอเนตระดับต่ำ (0.34g/L) เพื่อชดเชยการเพิ่มขึ้นของแรงดันออสโมติกที่เกิดจากการเติม HEPES ภายใต้สภาวะการเพาะเลี้ยงนี้ ฝาขวดเพาะเลี้ยงเซลล์แบบใช้แล้วทิ้งควรขันให้แน่นเพื่อป้องกันไม่ให้คาร์บอเนตจำนวนเล็กน้อยในสารละลายเพาะเลี้ยงกระจายไปในอากาศ ของเหลวจากวัฒนธรรมส่วนใหญ่มีฟีนอลสีแดงเป็นตัวบ่งชี้ค่า pH ของเหลวสำหรับเพาะเลี้ยงที่เป็นกรดจะมีสีส้มเหลือง และของเหลวในการเพาะเลี้ยงที่เป็นด่างจะมีสีแดงเข้มcell culture flask

2 ลด "ช่องการเจริญเติบโต": ผู้ใช้ส่วนใหญ่ไม่ได้ใช้ขวดเพาะเลี้ยงเซลล์แบบใช้แล้วทิ้งที่เคลือบไว้ล่วงหน้า แต่ใช้ขวดเพาะเลี้ยงเซลล์แบบใช้แล้วทิ้งทั่วไป สภาพแวดล้อมบนพื้นผิวไม่เอื้อต่อการวางเซลล์ต้นกำเนิดจากเยื่อหุ้มเซลล์ในสภาพแวดล้อมการเพาะเลี้ยงที่ปราศจากซีรัม กำแพง. วางที่อุณหภูมิ 37°C เป็นเวลา 5-10 นาที เพื่อรวมสารที่ส่งเสริมการยึดเกาะในตัวกลางเพาะเลี้ยงกับด้านล่างของขวดเพาะเลี้ยงเซลล์แบบใช้แล้วทิ้ง ซึ่งช่วยเพิ่มความสามารถในการยึดเกาะของเซลล์ต้นกำเนิดจากเยื่อหุ้มเซลล์และลดความน่าจะเป็นของ "รูโต" ".

Pay attention to these three points when using cell culture flasks

3. การย่อยของเซลล์: วางขวดให้ตั้งตรงและดูดอาหารเลี้ยงเชื้อออก หากมีเซลล์ผลัดเซลล์ผิวมากกว่าในอาหารเลี้ยงเชื้อ แสดงว่าเซลล์นั้นหลุดออกมาได้ง่าย เพียงเติม PBS+EDTA 1 มล. (0.02%) แล้วเขย่าขวดเพาะไปมาเล็กน้อยจนเซลล์หลุดออกหมด เติม MEM 10 มล. ผสมให้เข้ากัน ห้ามปิเปต แบ่งเป็น 2 ขวด ถ้าเซลล์หลุดไม่โตเกิน เพียงเติม MEM ขนาด 5 มล. ไม่มีบรรจุภัณฑ์แยกต่างหาก หากเซลล์ในขวดเกาะติดอย่างแน่นหนา ส่วนเหนือตะกอนของตัวกลางจะไม่มีเศษการผลัดเซลล์ และเซลล์นั้นรกมากกว่า 80% ให้ดูดอาหารเข้าไป จากนั้นเติม PBS+EDTA (0.02%) ลงไป 5 มล.) เขย่าขวดเล็กน้อยแล้วเพาะเลี้ยง ตั้งตรง ดูดขวดใส่ 1 มิลลิลิตรของตับอ่อน 0.05% ย่อยที่ 37°C ไม่เกิน 3 นาทีและเซลล์จะถูกย่อยและลอกออกอย่างสมบูรณ์ นำออกมาและเติมอาหารเพาะเชื้อ 10 มล. เพื่อปิเปตและผสมเบา ๆ แล้วแบ่งเป็น 2 ขวด

เซลล์มีความไวต่อสภาพแวดล้อมการเจริญเติบโต เนื่องจากเป็นวัสดุสิ้นเปลืองที่ใช้กันทั่วไป

ควรดำเนินการอย่างระมัดระวังและปฏิบัติตามขั้นตอนที่กำหนดอย่างเคร่งครัด เพื่อหลีกเลี่ยงการดำเนินการที่ไม่เหมาะสมซึ่งส่งผลต่อการเจริญเติบโตของเซลล์cell culture flasksขวดเพาะเลี้ยงเซลล์

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.