วิธีการใช้ขวดเพาะเลี้ยงเซลล์สำหรับการดำเนินการผ่านเซลล์

Thu May 19 10:05:03 CST 2022

ทางเดินของเซลล์หมายถึงกระบวนการในการแบ่งวัฒนธรรมออกเป็นส่วนเล็กๆ การเพาะซ้ำในภาชนะเพาะเลี้ยงอื่น จากนั้นจึงทำการเพาะเลี้ยง ขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ เป็นวัสดุสิ้นเปลืองทั่วไปในกระบวนการส่งผ่าน ดังนั้นขั้นตอนเฉพาะของการส่งผ่านเซลล์มีอะไรบ้าง

1 นำขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ออกจากตู้ฟัก ฉีดสเปรย์แอลกอฮอล์ 75% ลงบนพื้นผิวขวดด้วยกระป๋องสเปรย์แอลกอฮอล์ และโอนไปยังโต๊ะที่สะอาดเป็นพิเศษ

2 เปิดฝา ค่อยๆ ดูดอาหารเลี้ยงเชื้อเก่า เติมบัฟเฟอร์ PBS ในจำนวนที่เหมาะสมเพื่อล้าง 1-2 ครั้งด้วยปิเปตปาสเตอร์ และทิ้งบัฟเฟอร์ PBS

3 ใช้ปิเปตเติมตับอ่อน 1-2 มล. แล้วเขย่า "กากบาท" เพื่อให้ตับอ่อนสัมผัสกับเซลล์อย่างเต็มที่

4. ถ่ายขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ที่มีทริปซินไปยังระยะกล้องจุลทรรศน์แบบกลับหัว และสังเกตการย่อยของเซลล์ภายใต้กล้องจุลทรรศน์ เมื่อเซลล์มีลักษณะกลมและหลุดออกมาในปริมาณมาก ให้เตรียมยุติการย่อยอาหาร ฉีดสเปรย์แอลกอฮอล์ 75% ลงบนผิวขวดแล้วโอนไปยัง Super Net Taiwan.

5. ใช้ปิเปต (หรือปิเปตปาสเตอร์) เพื่อเพิ่มปริมาณที่เท่ากันของสื่อที่ประกอบด้วยซีรั่มเพื่อยุติการย่อยอาหาร ปิเปตอย่างทั่วถึงเพื่อให้เซลล์หลุดออกมาอย่างสมบูรณ์

How to use cell culture flasks for cell passaging operations

6. ถ่ายของเหลวที่ผสมในขวดไปยังหลอดสำหรับการปั่นแยก ปรับสมดุล และปั่นแยกเป็นเวลาประมาณ 5 นาที

7 หลังจากการปั่นแยก ให้ฉีดสเปรย์แอลกอฮอล์ที่พื้นผิวของหลอดหมุนเหวี่ยงด้วยกระป๋องสเปรย์แอลกอฮอล์ ย้ายไปยังโต๊ะที่สะอาดเป็นพิเศษ เปิดฝา และเทส่วนลอยเหนือตะกอนลงในถังทิ้ง

8 เติมสารที่ประกอบด้วยเซรั่มในปริมาณที่เหมาะสม และค่อยๆ ปิเปตด้วยปิเปตหรือปิเปตปาสเตอร์เพื่อทำให้เซลล์ถูกระงับ

9 แบ่งสารแขวนลอยของเซลล์ออกเป็นขวดเพาะเชื้อที่สะอาดปราศจากเชื้อ 2 ขวด (หรือมากกว่า) เติมอาหารเลี้ยงเชื้อในปริมาณที่เหมาะสม แล้วปิดฝา

10 วางขวดเพาะเลี้ยงแบบแบ่งส่วนไว้บนเวทีของกล้องจุลทรรศน์แบบคว่ำและสังเกตสภาพของเซลล์ ควรรับประกันจำนวนเซลล์ จำนวนน้อยเกินไปจะส่งผลต่อการเติบโต.

11. ทำเครื่องหมายที่ขวดเพื่อระบุเวลาที่ผ่านไป ประเภทเซลล์ ผู้ปฏิบัติงาน และข้อมูลอื่นๆ ก่อนนำไปใส่ในตู้ฟัก ให้ฉีดแอลกอฮอล์อีกครั้งที่พื้นผิวของตัวขวด ทำความสะอาดโต๊ะปฏิบัติการ เช็ดพื้นผิวของโต๊ะที่สะอาดเป็นพิเศษด้วยแอลกอฮอล์ 75% และทำความสะอาดของเหลวและขยะมูลฝอย

ด้านบนเป็นกระบวนการเฉพาะของการใช้ ขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ สำหรับการส่งผ่านเซลล์ โปรดทราบว่าคุณควรสวมเสื้อผ้าปลอดเชื้อ ถุงมือและหน้ากากปลอดเชื้อระหว่างการทำงาน และให้ความสนใจกับการดำเนินการปลอดเชื้อตลอดกระบวนการเพื่อหลีกเลี่ยงการปนเปื้อนของเซลล์

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.