วิธีควบคุมเวลาย่อยของทริปซินในขวดเพาะเลี้ยงเซลล์

Thu May 19 10:04:47 CST 2022

การเพาะเลี้ยงเซลล์เกี่ยวข้องกับการเพาะเลี้ยงเซลล์ การเพาะปลูก การเก็บเกี่ยว และกระบวนการอื่นๆ เซลล์ใน cell culture flasks เติบโตขึ้นในระดับหนึ่งและจำเป็นต้องเก็บเกี่ยวเซลล์ ในเวลานี้ เซลล์บนผนังขวดจะต้องถูกย่อยด้วยทริปซินแล้วจึงเก็บเกี่ยว ต้องควบคุมเวลาการย่อยอาหารระหว่างการใช้ pancreatin

Trypsin เป็นโปรตีเอสที่ต่างกันซึ่งสามารถลดโปรตีนบนเยื่อหุ้มเซลล์และขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ได้ โดยการย่อยสลายโปรตีนในตำแหน่งเฉพาะ โปรตีนที่รอยต่อระหว่างโปรตีนจะลดลง และเซลล์จะกลายเป็นทรงกลมเนื่องจากความตึงเครียดของโครงร่างภายในของพวกมัน ดังนั้นจึงแยกเซลล์ออกจากกัน ระดับของการย่อยอาหารของทริปซินเป็นขั้นตอนสำคัญในการเพาะเลี้ยงเซลล์: เศษเซลล์ที่ถูกย่อยมากเกินไปจะเพิ่มขึ้น ขยะสีดำเพิ่มขึ้น เซลล์จะหลุดออกเป็นชิ้นๆ ซึ่งส่งผลต่อความมีชีวิตของเซลล์อย่างจริงจัง และเซลล์บางเซลล์จะลอยและสูญเสียไปกับทริปซินที่ถูกทิ้ง การย่อยอาหารไม่เพียงพอ เซลล์จะถูกพัดออกจากผนังขวดได้ยาก การปิเปตซ้ำๆ จะสร้างความเสียหายต่อการมีชีวิตของเซลล์ด้วย

How to control the digestion time of trypsin in the cell culture flasks

เนื้อเยื่อหรือเซลล์ต่าง ๆ ตอบสนองต่อการทำงานของตับอ่อนต่างกัน กิจกรรมของเซลล์ที่กระจายตัวของตับอ่อนยังสัมพันธ์กับความเข้มข้น อุณหภูมิ และเวลาดำเนินการ เมื่อ pH เท่ากับ 8.0 และอุณหภูมิ 37 ความสามารถในการออกฤทธิ์ของสารละลายตับอ่อนจะค่อนข้างแรง เมื่อใช้ pancreatin ควรควบคุมความเข้มข้น อุณหภูมิ และเวลา เพื่อหลีกเลี่ยงความเสียหายของเซลล์ที่เกิดจากการย่อยอาหารมากเกินไป เนื่องจาก Ca2+, Mg2+, เซรั่มและโปรตีนสามารถลดการทำงานของตับอ่อนได้ จึงควรใช้ BSS ที่ไม่มี Ca2+ และ Mg2+ ในการเตรียมสารละลายตับอ่อน เช่น สารละลาย D-Hanks เมื่อยุติการย่อยอาหาร ให้ใช้อาหารเลี้ยงเชื้อที่มีซีรัมหรือตัวยับยั้งทริปซินเพื่อหยุดผลกระทบของตับอ่อนต่อเซลล์

นอกจากนี้ หากเป็นเซลล์ที่ซื้อมาใหม่ คุณสามารถใช้ทริปซินความเข้มข้นต่ำเพื่อค้นหาการย่อยอาหารก่อน เวลาและสังเกตว่าเซลล์นั้นกลมทุก ๆ นาทีและทำบันทึกหรือไม่ กล่าวโดยสรุป เมื่อเก็บเกี่ยวเซลล์ใน ขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ จะต้องควบคุมเวลาการย่อยของทริปซินเพื่อรักษาความมีชีวิตของเซลล์

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.