การใช้ขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ในการผ่านเซลล์

ขวดเพาะเลี้ยงเซลล์มีคอตรง ตอติคอลลิส คอมุม สามเหลี่ยม สี่เหลี่ยมผืนผ้า ฯลฯ ตามรูปทรงต่างๆ ข้อมูลจำเพาะประกอบด้วย 25ml, 75ml, 175ml และ 250ml ขนาดที่เล็กกว่าส่วนใหญ่จะใช้สำหรับการส่งผ่านเซลล์ การเก็บรักษาเซลล์ และการเตรียมเซลล์สำหรับการทดลอง ฯลฯ ใช้

หลังจากที่เซลล์เติบโตเป็นชั้นเดียวที่หนาแน่นในขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ โดยทั่วไปแล้ว อิ่มตัว เพื่อให้เซลล์เติบโตและเพิ่มจำนวนเซลล์ได้ต่อไป จะต้องทำการเพาะเลี้ยงย่อย (เพาะเลี้ยงใหม่) วัฒนธรรมย่อยยังเป็นวิธีการรักษาสายพันธุ์ของเซลล์อีกด้วย ในขณะเดียวกันก็เป็นกระบวนการที่จำเป็นสำหรับการทดลองต่างๆ โดยใช้เซลล์เพาะเลี้ยง เซลล์ที่ถูกระงับสามารถแยกออกได้โดยตรง ในขณะที่เซลล์ที่ยึดเกาะต้องถูกย่อยก่อนที่จะแยกออก ขั้นตอนเฉพาะมีดังนี้:

1. ทิ้งอาหารเลี้ยงเชื้อดั้งเดิมในขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ที่เต็มไปด้วยเซลล์

2. เติมสารละลายตับอ่อน 0.25% 0.5-1มล. เพื่อให้เซลล์ที่ด้านล่างของขวดแช่อยู่ในสารละลาย

3. วางจุกยางบนขวดแล้ววางไว้ใต้กล้องจุลทรรศน์คว่ำเพื่อสังเกตเซลล์ เมื่อเวลาผ่านไป เซลล์ยึดเกาะเดิมจะค่อยๆ มีลักษณะกลม และตับอ่อนก็ถูกทิ้งเมื่อเซลล์ยังไม่ลอย และเติมอาหารเลี้ยงเชื้อ 10 มล. เพื่อยุติการย่อยอาหาร การสังเกตการย่อยอาหารสามารถทำได้ด้วยตาเปล่า เมื่อเห็นก้นขวดสีขาวและมีรูเข็มเล็กๆ ปรากฏขึ้น การย่อยอาหารก็จะสิ้นสุดลง โดยทั่วไป เวลาย่อยที่อุณหภูมิห้องจะอยู่ที่ประมาณ 1-3 นาที

4. ใช้ปิเปตเป่าเซลล์ที่ยึดเกาะให้กลายเป็นสารแขวนลอย แบ่งออกเป็นสองถึงสามขวด เสียบน้ำยาวัฒนธรรมด้วยจุกยาง และวางไว้ที่อุณหภูมิ 37°C เพื่อทำการเพาะเลี้ยงต่อไป สังเกตการเจริญในวันรุ่งขึ้น

ข้างต้นคือการประยุกต์ใช้ ขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ ในการผ่านเซลล์ วิธีการเตรียมสารละลายสำหรับการย่อยมีดังนี้: ชั่งน้ำหนัก 0.25g ทริปซิน (กิจกรรม 1:250) เติม Ca2+ 100 มล. สารละลายแฮงค์ที่ปราศจาก Mg2+ ให้ละลาย กรอง ฆ่าเชื้อโดยการกรอง เก็บที่อุณหภูมิ 4°C และกลับสู่อุณหภูมิที่ 37 °C ก่อนใช้งาน นอกจากนี้ยังสามารถเพิ่ม EDTA ลงในสารละลายตับอ่อนเพื่อให้ความเข้มข้นสุดท้ายถึง 0.02%.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.