Hur man använder cellodlingsflaskor för att upptäcka E. coli-kolonier

Wed May 18 13:36:57 CST 2022

Koliforma bakterier hänvisar till en grupp gramnegativa icke-bacillus-bakterier som kan fermentera laktos, producera syra och gas, aerob och fakultativ anaerob. I praktiska tillämpningar används det ofta som en indikator på om maten är kontaminerad av avföring. Bland alla detektionsmetoder är användningen av cellodlingsflaskor för detektion den vanligaste. Operationsstegen är som följer:

1. Provtagning och spädning

(1) Enligt den aseptiska metoden, lägg 25 g (eller 25 ml) av testprovet i en cellodlingskolv som innehåller 225 ml sterilt vatten (förinställt lämpligt antal glaspärlor i kolven) eller en steriliserad mortel, och skaka den ordentligt. Eller slipa för att få en jämn utspädning på 1:10. Det är bäst att använda en steril homogenisator för fasta prover och centrifugera med en hastighet av 800010000r/min i 1 min för att göra en 1:10 utspädning.

(2) Använd ett 1mL sterilt sugrör för att suga 1 ml 1:10 utspädning, häll det i ett provrör som innehåller 9 ml sterilt vatten, skaka och blanda för att göra en 1:100 utspädning, ersätt med ett 1 ml sterilt sugrör, tryck på Ovanstående operationer görs successivt 10 gånger serieutspädningar .

(3) Enligt livsmedelshygienkraven eller uppskattningen av kontamineringen av testproverna, välj tre spädningar och inokulera 3 rör för varje spädning. Det kan också inokuleras direkt med provet.

2. Inledande jäsningstest av laktos

Detta kallas vanligtvis hypotetisk testning. Syftet är att kontrollera provet för bakterier som fermenterar laktos för att producera gas. Provet som ska testas inokuleras i jäsningsröret för laktosgallsalt, det dubbla jäsningsröret för laktosgallsalt används för inokulatet över 1 ml; det enda laktosgalsaltjäsningsröret används för 1 ml och mindre än 1 ml. Inokulera 3 rör för varje spädning och placera dem i en 36±1 ℃ inkubator i 24±2 timmar. Om alla laktosgallsaltfermenteringsrör inte producerar gas kan det rapporteras som negativt för koliforma bakterier. Om det finns gas som producerar, följ proceduren nedan.

3. Separationskultur

De gasproducerande fermentationsrören ströks ut och inokulerades på eosin-metylenblåagarplattor och odlades i en inkubator vid 36±1°C under 18-24 timmar. Därefter observerades kolonimorfologin och gramfärgning, mikroskopisk undersökning och återjäsningstest utfördes.

How to use cell culture flasks to detect E. coli colonies

4. Dubbelfermenteringstest för laktos

Det så kallade bekräftelsetestet, vars syfte är att bevisa att de gramnegativa icke-bacillusbakterier som isolerats från provröret och som var positiva i det initiala laktosjäsningstestet verkligen kan fermentera laktos för att producera gas. På det ovan nämnda selektiva EMB-mediet, välj 1 till 2 misstänkta koliforma kolonier för Gram-färgning, och inokulera laktosfermenteringsrör samtidigt och placera dem i en 36±l°C inkubator i 24±2 timmar för att observera gasen. produktion. . Där laktosjäsningsröret producerar gas och gramfärgningen är negativ, rapporteras Bacillus-fria bakterier som positiva för koliforma bakterier; där laktosfermenteringsröret inte producerar gas eller gramfärgningen är positiv, rapporteras den som negativ för koliforma bakterier.

Ovanstående är operationsmetoden för att använda cellodlingsflaskor för att detektera E. coli-gruppindikatorer. Escherichia coli är en viktig indikator som speglar om maten är förorenad. Att bemästra detektionsmetoden är en grundläggande färdighet som varje livsmedelsinspektör bör besitta.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.