Hur man kontrollerar matsmältningstiden för trypsin i cellodlingsflaskorna

Wed May 18 13:36:02 CST 2022

Cellodling involverar cellympning, odling, skörd och andra processer. Cellerna i cellkulturflaskor har växt till en viss grad och cellerna måste skördas. Vid denna tidpunkt måste cellerna på kolvens vägg smältas med trypsin och sedan skördas. Matsmältningstiden måste kontrolleras under användningen av pankreatin.

Trypsin är ett heterogent proteas, som kan bryta ned proteinet på cellmembranet och cellodlingsflaskorna. Genom att bryta ned proteinet på en specifik plats bryts proteinet i korsningen mellan proteinerna ned, och cellerna blir sfäriska på grund av spänningen i deras inre cytoskelett, och separerar därigenom cellerna. Graden av trypsinnedbrytning är ett nyckelsteg i cellodling: överdrivet smält cellskräp ökar, svart avskum ökar, celler kommer att falla av i bitar, vilket allvarligt påverkar cellviabiliteten, och vissa celler flyter och förlorar med det kasserade trypsinet; matsmältning Otillräcklig, celler är svåra att blåsa ner från flaskväggen, upprepad pipettering skadar också cellviabiliteten.

How to control the digestion time of trypsin in the cell culture flasks

Olika vävnader eller celler reagerar olika på pankreatins verkan. Aktiviteten hos pankreatin dispergerade celler är också relaterad till dess koncentration, temperatur och verkanstid. När pH är 8,0 och temperaturen är 37 är pankreatinlösningens verkningsförmåga relativt stark. Vid användning av pankreatin bör koncentrationen, temperaturen och tiden kontrolleras för att undvika cellskador orsakade av övermatsmältning. Eftersom Ca2+, Mg2+, serum och protein kan minska aktiviteten av pankreatin, bör BSS utan Ca2+ och Mg2+ användas vid beredning av pankreatinlösning, såsom D-Hanks lösning. När du avslutar matsmältningen, använd seruminnehållande odlingsmedium eller trypsinhämmare för att stoppa effekten av pankreatin på celler.

Om det dessutom är en nyinköpt cell kan du först använda en låg koncentration av trypsin för att ta reda på matsmältningen tid, och observera om cellerna är runda varje minut och gör en registrering. Kort sagt, när man skördar cellerna i cellodlingsflaskor måste trypsinuppslutningstiden kontrolleras för att upprätthålla cellviabiliteten.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.