Kako uporabljati bučke s celično kulturo za operacije prehajanja celic

Wed May 18 13:21:11 CST 2022

Prehod celic se nanaša na proces delitve kulture na majhne dele, ponovnega sejanja v drugo posodo za kulturo in nato gojenja. Bučke za celično kulturo so običajen potrošni material v procesu pasiranja, torej kakšni so posebni koraki prehoda celic?

1. Bučke s celično kulturo vzamemo iz inkubatorja, poškropimo 75-odstotni alkohol na površino steklenice z alkoholno razpršilno posodo in jo prestavimo na ultra-čisto mizo.

2. Odprite pokrov, nežno aspirirajte staro gojišče, dodajte ustrezno količino PBS pufra, da ga sperete 1-2 krat s Pasteurjevo pipeto, in zavrzite PBS pufer.

3. S pipeto dodajte 1-2 ml pankreatina in pretresite "križ", da bo pankreatin v celoti prišel v stik s celicami.

4. Bučko za celično kulturo s tripsinom prenesite v obrnjeni mikroskop in pod mikroskopom opazujte prebavo celic. Ko celice postanejo okrogle in odpadejo v velikih količinah, se pripravite na prekinitev prebave. Površino steklenice poškropite s 75 % alkohola in jo prenesite v super Net Taiwan.

5. S pipeto (ali Pasteurjevo pipeto) dodajte enako količino medija, ki vsebuje serum, da končate prebavo. Temeljito odpipetirajte, da celice popolnoma odpadejo.

How to use cell culture flasks for cell passaging operations

6. Mešano tekočino iz steklenice prenesite v centrifugalno epruveto, jo uravnotežite in centrifugirajte približno 5 minut.

7. Po centrifugiranju površino centrifugalne epruvete poškropite z alkoholno razpršilno posodo, jo prenesite na ultra-čisto mizo, odprite pokrov in supernatant vlijte v posodo za odpadke.

8. Dodajte ustrezno količino medija, ki vsebuje serum, in nežno pipetirajte s pipeto ali Pasteurjevo pipeto, da naredite celično suspenzijo.

9. Razdelite celično suspenzijo v 2 (ali več) čisti sterilni bučki za kulturo, dodajte ustrezno količino gojišča in zaprite pokrov.

10. Bučko z alikvotnim kulturo postavite na oder obrnjenega mikroskopa in opazujte stanje celic. Število celic je treba zagotoviti. Premajhno število bo vplivalo na rast.

11. Označite steklenico, da navedete čas prehoda, vrsto celice, operaterja in druge informacije. Preden jo daste v inkubator, ponovno poškropite površino telesa plastenke z alkoholom, očistite operacijsko mizo, obrišite površino ultra čiste mize s 75 % alkohola in očistite odpadno tekočino in smeti.

The zgoraj je specifičen postopek uporabe bučke za celično kulturo za prehod celic. Upoštevajte, da morate med delovanjem nositi sterilna oblačila, sterilne rokavice in maske ter paziti na aseptične postopke v celotnem procesu, da se izognete kontaminaciji celic.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.