Cum se utilizează baloanele de cultură celulară pentru a detecta coloniile de E. coli

Wed May 18 12:49:28 CST 2022

Bacteriile coliforme se referă la un grup de bacterii gram-negative non-bacil care pot fermenta lactoza, produce acid și gaz, aerobe și anaerobe facultative. În aplicațiile practice, este adesea folosit ca un indicator al faptului că alimentele sunt contaminate cu fecale. Dintre toate metodele de detectare, utilizarea baloane de cultură celulară pentru detectare este cea mai frecvent utilizată. Etapele operației sunt următoarele:

1. Prelevarea probelor și diluarea

(1) Conform metodei aseptice, puneți 25 g (sau 25 ml) din proba de testat într-un balon de cultură celulară care conține 225 ml apă sterilă (număr prestabilit de perle de sticlă în balon) sau un mortar sterilizat, și agitați-l bine. Sau măcinați pentru a obține o diluție uniformă de 1:10. Cel mai bine este să folosiți un omogenizator steril pentru probe solide și să centrifugeți la o viteză de 800010000r/min timp de 1 min pentru a face o diluție de 1:10.

(2) Utilizați un pai steril de 1 ml. pentru a aspira 1Ml de diluție 1:10, se toarnă într-o eprubetă care conține 9mL de apă sterilă, se agită și se amestecă pentru a face o diluție 1:100, se înlocuiește cu un pai steril de 1mL, se presează Operațiile de mai sus se fac succesiv de 10 ori diluții în serie .

(3) În funcție de cerințele de igienă alimentară sau de estimarea contaminării probelor de testat, se selectează trei diluții și se inoculează câte 3 tuburi pentru fiecare diluție. De asemenea, poate fi inoculat direct cu proba.

2. Testul de fermentație inițial al lactozei

Acest lucru este denumit în mod obișnuit testare ipotetică. Scopul său este de a verifica proba pentru bacterii care fermentează lactoza pentru a produce gaz. Proba de testat se inoculează în tubul de fermentare a sării biliare de lactoză, tubul de fermentare a sării biliare de lactoză dublă este utilizat pentru inoculul de peste 1 mL; tubul de fermentare a sărurilor biliare de lactoză unică este utilizat pentru 1 mL și mai puțin de 1 mL. Inoculați 3 tuburi pentru fiecare diluție și puneți-le într-un incubator la 36±1℃ timp de 24±2h. Dacă toate tuburile de fermentare a sărurilor biliare de lactoză nu produc gaz, acesta poate fi raportat ca negativ pentru bacteriile coliforme. Dacă se produce gaz, urmați procedura de mai jos.

3. Cultură de separare Tuburile de fermentare producătoare de gaze au fost striate și inoculate pe plăci de agar eozină cu albastru de metilen și cultivate într-un incubator la 36±1°C timp de 18-24 ore. Apoi, s-a observat morfologia coloniei și s-au efectuat colorații Gram, examen microscopic și test de refermentare.

4. Testul de dublă fermentație a lactozei

How to use cell culture flasks to detect E. coli colonies

Așa-numitul test de confirmare, al cărui scop este să demonstreze că bacteriile gram-negative non-bacil izolate din eprubeta care au fost pozitive la testul inițial de fermentare a lactozei pot într-adevăr să fermenteze lactoza pentru a produce gaz. Pe mediul EMB selectiv menționat mai sus, alegeți 1 până la 2 colonii de coliformi suspecte pentru colorarea Gram și inoculați tuburile de fermentare a lactozei în același timp și puneți-le într-un incubator la 36±l°C timp de 24±2 ore pentru a observa gazul. producție. . În cazul în care tubul de fermentare a lactozei produce gaz și colorația Gram este negativă, bacteriile fără bacil sunt raportate ca pozitive pentru coliformi; în cazul în care tubul de fermentare a lactozei nu produce gaz sau colorația Gram este pozitivă, este raportată ca negativă pentru coliforme. Escherichia coli este un indicator important care reflectă dacă alimentele sunt contaminate. Stăpânirea metodei de detectare este o abilitate de bază pe care fiecare inspector alimentar ar trebui să o posede.

Baloane de cultură celulară

The above is the operation method of using cell culture flasks to detect E. coli group indicators. Escherichia coli is an important indicator that reflects whether food is contaminated. Mastering the detection method is a basic skill that every food inspector should possess.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.