Cum se controlează timpul de digestie a tripsinei în baloanele de cultură celulară

Wed May 18 12:48:33 CST 2022

Cultura celulară implică inocularea celulelor, cultivarea, recoltarea și alte procese. Celulele din Baloane de cultură celulară au crescut într-o anumită măsură și celulele trebuie recoltate. În acest moment, celulele de pe peretele balonului trebuie digerate cu tripsină și apoi recoltate. Timpul de digestie trebuie controlat în timpul utilizării pancreatinei.

Tripsina este o protează eterogenă, care poate degrada proteina de pe membrana celulară și din baloanele de cultură celulară. Prin degradarea proteinei într-o locație specifică, proteina de la joncțiunea dintre proteine ​​este degradată, iar celulele devin sferice datorită tensiunii citoscheletului lor intern, separând astfel celulele. Gradul de digestie a tripsinei este o etapă cheie în cultura celulară: resturile de celule excesiv de digerate cresc, se mărește gunoiul negru, celulele se vor desprinde în bucăți, ceea ce afectează grav viabilitatea celulelor, iar unele celule plutesc și se pierd odată cu tripsina aruncată; digestia Insuficientă, celulele sunt greu de aruncat în jos de pe peretele sticlei, pipetarea repetată va afecta, de asemenea, viabilitatea celulară.

How to control the digestion time of trypsin in the cell culture flasks

Diferitele țesuturi sau celule reacționează diferit la acțiunea pancreatinei. Activitatea celulelor pancreatinei dispersate este, de asemenea, legată de concentrația, temperatura și timpul de acțiune. Când pH-ul este 8,0 și temperatura este 37, capacitatea de acțiune a soluției de pancreatină este relativ puternică. Când se utilizează pancreatina, concentrația, temperatura și timpul trebuie controlate pentru a evita deteriorarea celulelor cauzată de supra-digestie. Deoarece Ca2+, Mg2+, serul și proteinele pot reduce activitatea pancreatinei, BSS fără Ca2+ și Mg2+ ar trebui utilizat atunci când se prepară soluție de pancreatină, cum ar fi soluția D-Hanks. Când terminați digestia, utilizați mediu de cultură care conține ser sau inhibitor de tripsină pentru a opri efectul pancreatinei asupra celulelor.

În plus, dacă este o celulă nou achiziționată, puteți utiliza mai întâi o concentrație scăzută de tripsină pentru a afla digestia. timp și observați dacă celulele sunt rotunde în fiecare minut și faceți o înregistrare. Pe scurt, la recoltarea celulelor în baloane de cultură celulară, timpul de digestie a tripsinei trebuie controlat astfel încât să se mențină viabilitatea celulelor.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.