Aplicação de frascos de cultura celular na passagem de células

Thu May 19 09:41:48 CST 2022

Frascos de cultura de célulastem pescoço reto, torcicolo, pescoço de ângulo, triângulo, retângulo, etc. de acordo com diferentes formas. As especificações incluem 25ml, 75ml, 175ml e 250ml. Tamanhos menores são usados ​​principalmente para passagem de células, preservação de células e fornecimento de células para experimentos, etc. uso.

Depois que as células crescem em uma monocamada densa no frasco de cultura de células, elas são basicamente saturado. Para permitir que as células continuem a crescer e aumentar o número de células, elas devem ser subcultivadas (re-cultivadas). A subcultura também é uma forma de preservar as espécies celulares. Ao mesmo tempo, é um processo necessário para vários experimentos usando células cultivadas. As células suspensas podem ser separadas diretamente, enquanto as células aderentes precisam ser digeridas antes de serem separadas. As etapas específicas são as seguintes:

1. Descarte o meio de cultura original no frasco de cultura de células cheio de células.

2. Adicione 0,5-1ml de solução de pancreatina a 0,25%, de modo que as células no fundo do frasco fiquem imersas na solução.

Application of cell culture flasks in cell passage

3. Coloque uma rolha de borracha no frasco e coloque-o sob um microscópio invertido para observar as células. Com o passar do tempo, as células aderentes originais gradualmente tenderam a ser redondas, e a pancreatina foi descartada quando as células ainda não haviam flutuado, e 10ml de meio de cultura foram adicionados para finalizar a digestão. A observação da digestão também pode ser feita a olho nu. Quando o fundo da garrafa é visto branco e aparecem pequenos orifícios, a digestão pode ser encerrada. Geralmente, o tempo de digestão à temperatura ambiente é de cerca de 1-3 minutos.

4. Use uma pipeta para soprar as células aderentes em uma suspensão, divida-as em duas a três garrafas, tampe a solução de cultura com uma rolha de borracha e coloque-a a 37 ° C para continuar a cultura. Observe o crescimento aderente no dia seguinte.

O acima é a aplicação de frascos de cultura de células na passagem de células. O método de preparação da solução de digestão é o seguinte: Pesar 0,25g de tripsina (atividade 1:250), adicionar 100ml de solução de Hank sem Ca2+, Mg2+ para dissolver, filtrar Esterilizar por filtração, armazenar a 4°C e retornar à temperatura a 37 °C antes do uso. O EDTA também pode ser adicionado à solução de pancreatina para fazer com que a concentração final atinja 0,02%.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.