lysogenic ဘက်တီးရီးယားများကို စစ်ဆေးရာတွင် ဆဲလ်ယဉ်ကျေးမှု ဖန်ပုလင်းများကို အသုံးပြုခြင်း။

Wed May 18 15:14:14 CST 2022

Lysogenic ဘက်တီးရီးယားများသည် ၎င်းတို့၏ ခရိုမိုဇုန်းများတွင် ပေါင်းစပ်ထားသော ပရိုဂရမ်များပါရှိသော ဘက်တီးရီးယားများကို ရည်ညွှန်းပြီး ပုံမှန်အတိုင်း ကြီးထွားနိုင်ပြီး မျိုးပွားနိုင်သည်။ အပျော့စား ဘက်တီးရီးယားပိုးမွှားများကို ကူးဆက်ခြင်း၊ မျိုးရိုးဗီဇဆိုင်ရာ အင်ဂျင်နီယာပိုင်းဆိုင်ရာနှင့် မော်လီကျူးဇီဝဗေဒနယ်ပယ်များတွင် တွင်ကျယ်စွာ အသုံးပြုခဲ့သည်။ ဆဲလ်ယဉ်ကျေးမှုပုလင်း သည် ဘက်တီးရီးယားများ၏ lysogenicity ကို စစ်ဆေးရန် အသုံးပြုနိုင်သည်။ တိကျသော ခွဲစိတ်မှုနည်းလမ်းမှာ အောက်ပါအတိုင်းဖြစ်သည်-

1။ lysogenic ဘက်တီးရီးယားများ၏ ယဉ်ကျေးမှု- 20ml LB ယဉ်ကျေးမှုဖျော်ရည် ပါဝင်သော 250ml LB ယဉ်ကျေးမှုဖျော်ရည် ပါဝင်သော 250ml ဆဲလ်ယဉ်ကျေးမှု ပုလင်းထဲသို့ LB လျှောစောက်ဖြင့် အသက်သွင်းထားသော E. coli 225 (λ) ကို Inoculate inoculate လုပ်ပြီးနောက် ၎င်းမှ 2ml ဘက်တီးရီးယား ဆိုင်းထိန်းစနစ်ကို ယူပြီး LB ဟင်းရည် 20ml ပါရှိသော 250ml Erlenmeyer ဘူးတစ်ခုတွင် 37°C တွင် လှုပ်ခါပြီး လော့ဂရစ်သမ်အဆင့်မှ 2နာရီကြာအောင် လှုပ်ခါပြီး ယဉ်ကျေးမှုကို မွှေပါ။

2။ အခမဲ့ phage ကို ဖယ်ထုတ်ပါ- စမ်းသပ်ရမည့် ပိုးသည် Bacillus ဖြစ်ပါက၊ ၎င်းကို spores suspension အဖြစ် ပြုလုပ်နိုင်ပြီး၊ ထို့နောက် 80°C တွင် ကုသနိုင်ပြီး lysogenic ဘက်တီးရီးယားများ၏ မျက်နှာပြင်ပေါ်တွင် စုပ်ယူနိုင်ကာ ကင်းစင်နိုင်သည့် phage ကို သတ်ရန် 80°C ဖြင့် 10 မိနစ်ကြာ ကုသနိုင်သည်။ စမ်းသပ်မည့် ရောဂါပိုးသည် Bacillus မဟုတ်ပါက၊ မျက်နှာပြင်-စုပ်ယူနိုင်သော နှင့် ကင်းစင်သော phage ကိုဖယ်ရှားရန် log phase lysogen ဆဲလ်များကို ဆေးကြောရန်အတွက် phage သို့မဟုတ် 0.2% sodium citrate solution ဖြင့် ပြင်ဆင်ထားသော antiserum ကို အသုံးပြုပါ။ 4000r/min ဖြင့် 10 မိနစ်ကြာ centrifugation ပြုလုပ်ပြီးနောက်၊ အလွှာနှစ်ထပ်ပန်းကန်သတ်မှတ်ခြင်းအတွက် အထိခိုက်မခံသောညွှန်ဘက်တီးရီးယားများနှင့်အတူ supernatant ကို ပေါင်းထည့်နိုင်သည်၊ ၎င်းသည် နမူနာ၏အခမဲ့ phage နှင့် lysogenic ဘက်တီးရီးယားများကို စုပ်ယူသည့် phage ကိုစမ်းသပ်ရန်အတွက် အသုံးပြုသည့် အလွှာနှစ်ထပ်ပန်းကန်သတ်မှတ်ခြင်းအတွက် အထိခိုက်မခံသောညွှန်ပြသည့်ဘက်တီးရီးယားများကို ပေါင်းထည့်နိုင်သည်။ centrifugation ပြီးနောက် phage ဆဲလ်များကို induced.

Application of cell culture flasks in the examination of lysogenic bacteria

3. lysogenic ဘက်တီးရီးယားများ၏ လှုံ့ဆော်မှု- ဗဟိုချုပ်ကိုင်မှုပြီးနောက် စုဆောင်းရရှိထားသော ဘက်တီးရီးယားများကို ပိုးမွှားပုံမှန်ဆားရည်ဖြင့် နှစ်ကြိမ်ဆေးကြောပြီး ပုံမှန်ဆားရည်ဖြင့် 1011 ဆဲလ်/မီလီလီတာအဖြစ်သို့ သို့မဟုတ် 100mmol/l Tris-HCL ကြားခံ (pH7.0) ဘက်တီးရီးယားဆိုင်းထိန်းမှုအတွက် ပေါင်းထည့်ပါ။ ပန်းကန်တစ်ခုစီသို့ ဘက်တီးရီးယား ဆိုင်းထိန်းစနစ် 5ml ကို 30W မှ 30cm အကွာအဝေးတွင် ခရမ်းလွန်ရောင်ခြည်ဖြင့် ဖြာထွက်ကာ 2 နာရီကြာ ပြင်းအားနှစ်ဆ LB culture solution 5ml ကို ချက်ချင်းထည့်ကာ ရောမွှေပြီး 37°C တွင် အမှောင်ထဲတွင် 2 နာရီကြာ ပျိုးထားပါ။

၄။ lysogenic မျိုးကွဲများကို စစ်ဆေးခြင်း- နှစ်ထပ်အလွှာရှိသော agar method အရ လုပ်ဆောင်ပါ၊ အထက်ဖော်ပြပါ lysate ထဲသို့ chloroform အစက်အနည်းငယ်ထည့်ကာ 10-fold dilution method ဖြင့် သင့်လျော်စွာ ဖျန်းပေးပါ။ dilution ၏ dilution သုံးခုကိုရွေးချယ်ပြီးနောက်၊ အရောတစ်ခုစီအတွက် 0.3ml ကိုယူပါ။ 0.2ml of logarithmic phase sensitive E. coli 226 bacteria suspension နှင့် ကောင်းစွာရောမွှေပြီး 45°C အထိ အရည်ပျော်ပြီး အအေးခံထားသော LB ကိုယ်ထည်တစ်ဝက်ကို ထည့်ပြီး ချက်ခြင်း ရောမွှေပြီးနောက် LB အစိုင်အလတ်ပန်းကန်ပြားပေါ်သို့ လောင်းထည့်ပါ။ ခိုင်ခံ့ပြီးပါက 37 ℃ တွင် 6 နာရီကြာ ပျိုးထောင်ပါ။ စိုက်ပျိုးထားသောပန်းကန်ပြားပေါ်တွင် plaque အများအပြားပေါ်လာပါက၊ စမ်းသပ်ထားသော strain သည် lysogen ဖြစ်သည်.

ဘက်တီးရီးယားတွင် lysogenicity ရှိ၊ မရှိ စစ်ဆေးရန်အတွက် အထက်ဖော်ပြပါအဆင့်များကို လိုက်နာပါ။ စမ်းသပ်မှုရလဒ်များကို ထိခိုက်စေသော မလျော်ကန်သော လုပ်ဆောင်ချက်ကို ရှောင်ရှားရန် ခွဲစိတ်မှုအတွင်း ပိုးမွှားဖြစ်ပွားမှုကို အာရုံစိုက်ပါ။

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.