Kif tuża fliexken tal-kultura taċ-ċelluli biex tiskopri kolonji ta 'E. coli

Wed May 18 12:11:18 CST 2022

Il-batterji koliformi jirreferu għal grupp ta 'batterji gram-negattivi mhux baċillus li jistgħu jiffermementaw il-lattożju, jipproduċu aċidu u gass, aerobiċi u anerobiċi fakultattivi. F'applikazzjonijiet prattiċi, ħafna drabi jintuża bħala indikatur ta 'jekk l-ikel huwiex ikkontaminat mill-ħmieġ. Fost il-metodi kollha ta 'skoperta, l-użu ta' Flasks tal-kultura taċ-ċelluli għall-iskoperta huwa l-aktar wieħed użat komunement. Il-passi tal-operazzjoni huma kif ġej:

1. Teħid ta’ kampjuni u dilwizzjoni

(1) Skont il-metodu asettiku, poġġi 25g (jew 25mL) tal-kampjun tat-test fi flixkun tal-kultura taċ-ċelluli li jkun fih 225mL ilma sterili (numru xieraq ta’ żibeġ tal-ħġieġ issettjat minn qabel fil-flask) jew mehrież sterilizzat, u ħawwadha sewwa. Jew itħan biex tagħmel dilwizzjoni uniformi ta '1:10. L-aħjar huwa li tuża omoġenizzatur sterili għal kampjuni solidi u ċentrifuga b'veloċità ta '800010000r/min għal 1 min biex tagħmel dilwizzjoni 1:10.

(2) Uża tiben sterili ta' 1mL biex terda 1Ml ta 'dilwizzjoni 1:10, ferrah f'tubu tat-test li jkun fih 9mL ta' ilma sterili, ħawwad u ħawwad biex tagħmel dilwizzjoni 1:100, ibdel bi tiben sterili 1mL, agħfas L-operazzjonijiet ta 'hawn fuq isiru suċċessivament 10 darbiet dilwizzjonijiet serjali .

(3) Skont ir-rekwiżiti tal-iġjene tal-ikel jew l-istima tal-kontaminazzjoni tal-kampjuni tat-test, agħżel tliet dilwizzjonijiet u inokula 3 tubi għal kull dilwizzjoni. Jista 'wkoll jiġi mlaqqam direttament mal-kampjun.

2. Test tal-fermentazzjoni inizjali tal-lattożju

Dan huwa komunement imsejjaħ ittestjar ipotetiku. L-iskop tiegħu huwa li jiċċekkja l-kampjun għal batterji li jiffermementaw il-lattożju biex jipproduċu gass. Il-kampjun li għandu jiġi ttestjat jiġi mlaqqam fit-tubu tal-fermentazzjoni tal-melħ tal-bili tal-lattożju, it-tubu tal-fermentazzjoni tal-melħ tal-bili tal-lattożju doppju jintuża għall-inoculum 'il fuq minn 1 mL; it-tubu tal-fermentazzjoni tal-melħ tal-bili tal-lattożju wieħed jintuża għall-1 mL u inqas minn 1 mL. Inokula 3 tubi għal kull dilwizzjoni u poġġihom f'inkubatur ta' 36±1℃ għal 24±2h. Jekk it-tubi kollha tal-fermentazzjoni tal-melħ tal-bili tal-lattożju ma jipproduċux gass, jista 'jiġi rrappurtat bħala negattiv għal batterji koliformi. Jekk ikun hemm produzzjoni tal-gass, imbagħad Segwi l-proċedura hawn taħt.

3. Kultura ta 'separazzjoni

It-tubi tal-fermentazzjoni li jipproduċu l-gass ġew imqaxxra u mlaqqma fuq pjanċi tal-agar blu tal-eosin methylene, u kkultivati ​​f'inkubatur f'36±1 °C għal 18-24 siegħa. Imbagħad, ġiet osservata l-morfoloġija tal-kolonja u saru t-tbajja’ Gram, eżami mikroskopiku u test ta’ rifermentazzjoni.

How to use cell culture flasks to detect E. coli colonies

4. Test ta 'fermentazzjoni doppja tal-lattożju

L-hekk imsejjaħ test ta' konferma, li l-għan tiegħu huwa li jipprova li l-batterji gram-negattivi mhux baċillus iżolati mit-tubu tat-test li kien pożittiv fit-test inizjali tal-fermentazzjoni tal-lattożju jistgħu tabilħaqq jiffermementaw il-lattożju biex jipproduċu gass. Fuq il-medju selettiv EMB imsemmi hawn fuq, agħżel 1 sa 2 kolonji koliformi suspettużi għat-tbajja 'Gram, u inokula tubi tal-fermentazzjoni tal-lattożju fl-istess ħin, u poġġihom f'inkubatur ta' 36±l°C għal 24±2 siegħat biex tosserva l-gass. produzzjoni. . Fejn it-tubu tal-fermentazzjoni tal-lattożju jipproduċi gass u t-tebgħa tal-gramma hija negattiva, batterji ħielsa mill-Bacillus huma rrappurtati bħala pożittivi għall-koliformi; fejn it-tubu tal-fermentazzjoni tal-lattożju ma jipproduċix gass jew it-tebgħa tal-gramma hija pożittiva, hija rrappurtata bħala negattiva għall-koliformi.

Dan ta 'hawn fuq huwa l-metodu ta' operazzjoni ta 'l-użu ta' Flasks tal-kultura taċ-ċelluli biex jinstabu indikaturi tal-grupp E. coli. Escherichia coli huwa indikatur importanti li jirrifletti jekk l-ikel huwiex ikkontaminat. Il-ħakma tal-metodu ta' skoperta hija ħila bażika li kull spettur tal-ikel għandu jkollu.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.