Kaip naudoti ląstelių kultūros kolbas E. coli kolonijoms aptikti

Wed May 18 11:58:58 CST 2022

Koliforminės bakterijos reiškia gramneigiamų ne bacilų bakterijų grupę, kuri gali fermentuoti laktozę, gaminti rūgštis ir dujas, aerobines ir fakultatyvines anaerobines. Praktikoje jis dažnai naudojamas kaip indikatorius, rodantis, ar maistas yra užterštas išmatomis. Tarp visų aptikimo metodų dažniausiai naudojamas ląstelių kultūros kolbos aptikimui. Veikimo veiksmai yra tokie:

1. Mėginių ėmimas ir skiedimas

(1) Pagal aseptinį metodą įdėkite 25 g (arba 25 ml) tiriamojo mėginio į ląstelių kultūros kolbą, kurioje yra 225 ml sterilaus vandens (kolboje nustatytas tinkamas stiklo karoliukų skaičius) arba sterilizuotą skiedinį, ir gerai suplakite. Arba sumalkite, kad būtų vienodas praskiedimas santykiu 1:10. Kietiems mėginiams geriausia naudoti sterilų homogenizatorių ir centrifuguoti 800010000 aps Norėdami susiurbti 1Ml 1:10 praskiedimo, supilkite į mėgintuvėlį, kuriame yra 9 ml sterilaus vandens, sukratykite ir išmaišykite, kad praskiedtumėte santykiu 1:100, pakeiskite 1 ml steriliu šiaudeliu, paspauskite Pirmiau nurodytos operacijos atliekamos iš eilės 10 kartų praskiedus serijomis. .

(3) Atsižvelgdami į maisto higienos reikalavimus arba įvertintą tiriamųjų mėginių užterštumą, pasirinkite tris skiedimus ir kiekvienam skiedimui pasėkite po 3 mėgintuvėlius. Jį taip pat galima pasėti tiesiogiai mėginiu.

2. Pradinis laktozės fermentacijos testas

Tai paprastai vadinama hipotetiniu tyrimu. Jo tikslas – patikrinti, ar mėginyje nėra bakterijų, kurios fermentuoja laktozę, kad susidarytų dujos. Tiriamas mėginys sėjamas į laktozės tulžies druskos fermentacijos mėgintuvėlį, dvigubos laktozės tulžies druskos fermentacijos vamzdelis naudojamas inokuliatui, viršijančiam 1 ml; Vieno laktozės tulžies druskos fermentacijos vamzdelis naudojamas 1 ml ir mažiau nei 1 ml. Kiekvienam skiedimui pasėkite po 3 mėgintuvėlius ir įdėkite juos į 36±1℃ inkubatorių 24±2 valandoms. Jei visi laktozės tulžies druskos fermentacijos vamzdeliai negamina dujų, gali būti pranešta, kad tai neigiama koliforminėms bakterijoms. Jei susidaro dujos, atlikite toliau pateiktą procedūrą.

3. Atskyrimo kultūra

Dujas gaminantys fermentacijos mėgintuvėliai buvo išbarstyti juostelėmis ir pasėti ant eozino metileno mėlynojo agaro plokštelių ir kultivuojami inkubatoriuje 36 ± 1 °C temperatūroje 18-24 valandas. Tada buvo stebima kolonijų morfologija ir atliktas Gramo dažymas, mikroskopinis tyrimas ir pakartotinės fermentacijos testas.

4. Laktozės dvigubos fermentacijos testas

How to use cell culture flasks to detect E. coli colonies

Vadinamasis patvirtinimo testas, kurio tikslas – įrodyti, kad iš mėgintuvėlio išskirtos gramneigiamos ne bacilos bakterijos, kurios buvo teigiamos atliekant pradinį laktozės fermentacijos testą, tikrai gali fermentuoti laktozę, kad susidarytų dujos. Aukščiau minėtoje selektyvioje EMB terpėje paimkite 1–2 įtartinas koliformines kolonijas Gramo dažymui, tuo pačiu metu pasėkite laktozės fermentacijos mėgintuvėlius ir padėkite juos į 36±l°C inkubatorių 24±2 valandoms, kad galėtumėte stebėti dujas. gamyba. . Kai laktozės fermentacijos vamzdelis gamina dujas ir gramų dėmės yra neigiamos, bakterijos, kuriose nėra Bacillus, yra teigiamos koliforminėms bakterijoms; jei laktozės fermentacijos vamzdelis negamina dujų arba gramų dėmės yra teigiamos, pranešama, kad ji yra neigiama koliforminėms bakterijoms.

Aukščiau pateiktas

veikimo metodas E. coli grupės indikatoriams aptikti. Escherichia coli yra svarbus rodiklis, parodantis, ar maistas yra užterštas. Aptikimo metodo įvaldymas yra pagrindinis įgūdis, kurį turėtų turėti kiekvienas maisto inspektorius.cell culture flasksląstelių kultūros kolbos

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.