English
Ląstelių pasėjimas reiškia kultūros padalijimą į mažas dalis, pakartotinį sėjimą į kitą kultūros indą ir tada kultivavimą. Ląstelių kultūros kolbos yra įprastas pernešimo procese vartojamas produktas, taigi kokie yra konkretūs ląstelių pasėjimo etapai?
1. Išimkite ląstelių kultūrų kolbas iš inkubatoriaus, purškite 75% alkoholio ant buteliuko paviršiaus alkoholio purškimo balionėliu ir perkelkite ant itin švaraus stalo.
2. Atidarykite dangtelį, švelniai išsiurbkite seną auginimo terpę, įpilkite atitinkamą kiekį PBS buferio, kad 1–2 kartus išplautumėte Pasteur pipete, ir išmeskite PBS buferį.
3. Pipete įpilkite 1–2 ml pankreatino ir sukratykite „kryželį“, kad pankreatinas visiškai susiliestų su ląstelėmis.
4. Ląstelių kultūros kolbą su tripsinu perkelkite į apversto mikroskopo stadiją ir stebėkite ląstelių virškinimą mikroskopu. Kai ląstelės tampa apvalios ir nukrinta dideliais kiekiais, pasiruoškite nutraukti virškinimą. Apipurkškite buteliuko paviršių 75% alkoholiu ir perkelkite į super Net Taiwan.
5. Pipete (arba Pasteur pipete) įpilkite vienodą kiekį serumo turinčios terpės, kad užbaigtumėte virškinimą. Kruopščiai supilkite pipetę, kad ląstelės visiškai nukristų.
6. Sumaišytą skystį buteliuke perkelkite į centrifugos mėgintuvėlį, subalansuokite ir centrifuguokite apie 5 minutes.
7. Po centrifugavimo centrifugos mėgintuvėlio paviršių apipurkškite alkoholio purkštuvu, perkelkite ant itin švaraus stalo, atidarykite dangtį ir supilkite supernatantą į atliekų baką.
8. Įpilkite atitinkamą tūrį serumo turinčios terpės ir švelniai pipete pipete arba Pasteur pipete supilkite ląstelių suspensiją.
9. Padalinkite ląstelių suspensiją į 2 (ar daugiau) švarių sterilių auginimo kolbų, įpilkite atitinkamą kiekį auginimo terpės ir uždarykite dangtį.
10. Įdėkite alikvotinę kultūrų kolbą ant apversto mikroskopo scenos ir stebėkite ląstelės būklę. Ląstelių skaičius turėtų būti garantuotas. Per mažas skaičius turės įtakos augimui.
11. Pažymėkite butelį, kad nurodytumėte praėjimo laiką, ląstelės tipą, operatorių ir kitą informaciją. Prieš įdėdami į inkubatorių, buteliuko korpuso paviršių dar kartą apipurkškite alkoholiu, nuvalykite operacinį stalą, nuvalykite itin švaraus stalo paviršių 75% alkoholiu ir išvalykite atliekas bei šiukšles.
aukščiau yra konkretus ląstelių kultūros kolbos naudojimo ląstelių pravedimui procesas. Atminkite, kad dirbdami turėtumėte dėvėti sterilius drabužius, sterilias pirštines ir kaukes ir viso proceso metu atkreipkite dėmesį į aseptines operacijas, kad išvengtumėte ląstelių užteršimo.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.