English
Ląstelių kultūra apima ląstelių inokuliaciją, auginimą, derliaus nuėmimą ir kitus procesus. ląstelių kultūros kolbos esančios ląstelės tam tikru mastu išaugo ir jas reikia surinkti. Šiuo metu ląsteles ant kolbos sienelės reikia suvirškinti tripsinu ir tada surinkti. Vartojant pankreatiną, būtina kontroliuoti virškinimo laiką.
Tripsinas yra nevienalytė proteazė, kuri gali skaidyti baltymą ant ląstelės membranos ir ląstelių kultūros kolbų. Skaidant baltymą tam tikroje vietoje, baltymų sandūroje esantis baltymas suyra, o ląstelės dėl vidinio citoskeleto įtempimo tampa sferinės, taip atskirdamos ląsteles. Tripsino virškinimo laipsnis yra pagrindinis ląstelių kultūros žingsnis: per daug virškinamų ląstelių nuolaužų padaugėja, padaugėja juodų nuosėdų, ląstelės subyrės į gabalus, o tai labai paveiks ląstelių gyvybingumą, o kai kurios ląstelės plūduriuoja ir praranda su išmestu tripsinu; Virškinimas Nepakankamas, ląsteles sunku nupūsti nuo buteliuko sienelės, pakartotinis pipetavimas taip pat pakenks ląstelių gyvybingumui.
Skirtingi audiniai ar ląstelės skirtingai reaguoja į pankreatino veikimą. Pankreatino išsklaidytų ląstelių aktyvumas taip pat susijęs su jo koncentracija, temperatūra ir veikimo laiku. Kai pH yra 8,0 ir temperatūra yra 37, pankreatino tirpalo veikimo gebėjimas yra gana stiprus. Vartojant pankreatiną, reikia kontroliuoti koncentraciją, temperatūrą ir laiką, kad būtų išvengta ląstelių pažeidimo, kurį sukelia per didelis virškinimas. Kadangi Ca2+, Mg2+, serumas ir baltymai gali sumažinti pankreatino aktyvumą, ruošiant pankreatino tirpalą, pavyzdžiui, D-Hanks tirpalą, reikia naudoti BSS be Ca2+ ir Mg2+. Nutraukdami virškinimą, naudokite serumo turinčią auginimo terpę arba tripsino inhibitorių, kad sustabdytumėte pankreatino poveikį ląstelėms.
Be to, jei tai naujai įsigyta ląstelė, pirmiausia galite naudoti mažą tripsino koncentraciją, kad išsiaiškintumėte virškinimą. laiko, ir kas minutę stebėkite, ar ląstelės yra apvalios, ir padarykite įrašą. Trumpai tariant, renkant ląsteles ląstelių kultūros kolbos, tripsino virškinimo laikas turi būti kontroliuojamas taip, kad būtų išlaikytas ląstelių gyvybingumas.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.