Ląstelių kultūros kolbosturi tiesų kaklą, tortikollis, kampinį kaklą, trikampį, stačiakampį ir kt. pagal skirtingas formas. Specifikacijos apima 25 ml, 75 ml, 175 ml ir 250 ml. Mažesni dydžiai dažniausiai naudojami ląstelėms perduoti, ląstelėms išsaugoti, ląstelėms tiekti eksperimentams ir pan. naudojimui.
Ląstelės išauga į tankų monosluoksnį ląstelių kultūros kolboje, jos iš esmės yra prisotintas. Kad ląstelės galėtų toliau augti ir padidinti ląstelių skaičių, jos turi būti subkultūruojamos (perkultūrinamos). Subkultūra taip pat yra būdas išsaugoti ląstelių rūšis. Tuo pačiu metu tai yra būtinas procesas atliekant įvairius eksperimentus, naudojant kultivuotas ląsteles. Pakabintas ląsteles galima atskirti tiesiogiai, o prilipusias ląsteles reikia suvirškinti prieš jas atskiriant. Konkretūs veiksmai yra tokie:
1. Išmeskite pradinę auginimo terpę į ląstelių auginimo kolbą, pilną ląstelių.
2. Įpilkite 0,5–1 ml 0,25% pankreatino tirpalo, kad buteliuko dugne esančios ląstelės būtų panardintos į tirpalą.
3. Ant buteliuko uždėkite guminį kamštį ir padėkite jį po apverstu mikroskopu, kad galėtumėte stebėti ląsteles. Laikui bėgant, pradinės prilipusios ląstelės palaipsniui tapo apvalios, o pankreatinas buvo išmestas, kai ląstelės dar nebuvo plūduriuojančios, ir buvo pridėta 10 ml auginimo terpės, kad būtų nutrauktas virškinimas. Virškinimą galima stebėti ir plika akimi. Kai buteliuko dugnas tampa baltas ir atsiranda smulkių skylučių, virškinimas gali būti nutrauktas. Paprastai virškinimo laikas kambario temperatūroje yra apie 1-3 minutes.
4. Pipete išpūskite prilipusias ląsteles į suspensiją, padalinkite jas į du ar tris buteliukus, užkimškite kultūros tirpalą guminiu kamščiu ir padėkite jį į 37°C, kad tęstumėte kultivavimą. Kitą dieną stebėkite sukibimą.
Aukščiau aprašyta ląstelių kultūros kolbose taikymas ląstelių pravedimui. Virškinimo tirpalo paruošimo būdas yra toks: pasverkite 0,25 g tripsino (aktyvumas 1:250), įpilkite 100 ml Ca2+, be Mg2+ Hanko tirpalo, kad ištirptų, filtruokite Sterilizuokite filtruojant, laikykite 4 °C temperatūroje ir grąžinkite į 37 °C temperatūrą. °C prieš naudojimą. EDTA taip pat galima pridėti į pankreatino tirpalą, kad galutinė koncentracija pasiektų 0,02%.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.