細胞継代における細胞培養フラスコの適用

細胞培養フラスコさまざまな形に応じて、ストレートネック、斜頸、アングルネック、三角形、長方形などがあります。仕様には、25ml、75ml、175ml、および250mlが含まれます。小さいサイズは、主に細胞の継代、細胞の保存、実験用の細胞の提供などに使用されます。

細胞が細胞培養フラスコ内で高密度の単層に成長した後、それらは基本的に飽和。細胞が成長し続け、細胞数を増やすことができるようにするには、それらを継代培養（再培養）する必要があります。継代培養は、細胞種を保存する方法でもあります。同時に、培養細胞を用いた様々な実験に必要なプロセスです。浮遊細胞は直接分離できますが、付着細胞は分離する前に消化する必要があります。具体的な手順は次のとおりです。

1。細胞で満たされた細胞培養フラスコ内の元の培地を廃棄します。

2。 0.5〜1mlの0.25％パンクレリパーゼ溶液を加え、ボトルの底にある細胞が溶液に浸るようにします。

3。ボトルにゴム栓をして倒立顕微鏡下に置き、細胞を観察します。時間の経過とともに、元の付着細胞は徐々に丸くなる傾向があり、細胞がまだ浮いていないときにパンクレリパーゼを廃棄し、10mlの培地を加えて消化を停止させた。消化の観察も肉眼で行うことができます。ボトルの底が白く見え、細かいピンホールが現れたら、消化を終了することができます。一般的に、室温での消化時間は約1〜3分です。

4。ピペットを使用して付着細胞を懸濁液に吹き込み、2〜3本のボトルに分け、培養液をゴム栓で塞ぎ、37℃に置いて培養を続けます。翌日、付着性の成長を観察します。

上記は、細胞継代における細胞培養フラスコの適用です。消化液の調製方法は次のとおりです。0.25gのトリプシン（活性1：250）を量り、100mlのCa2 +、Mg2 +を含まないハンクス溶液を加えて溶解し、ろ過滅菌し、4°Cで保存し、37℃で温度に戻します。使用前に°C。 EDTAをパンクレリパーゼ溶液に添加して、最終濃度を0.02％に到達させることもできます。

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.