Hvernig á að stjórna meltingartíma trypsíns í frumuræktunarflöskunum

Wed May 18 14:49:23 CST 2022

Frumurækt felur í sér frumu sáningu, ræktun, uppskeru og aðra ferla. Frumurnar í frumuræktunarflöskur hafa stækkað að vissu marki og það þarf að uppskera frumurnar. Á þessum tíma þarf að melta frumurnar á flöskuveggnum með trypsíni og síðan uppskera. Stýra þarf meltingartímanum meðan á notkun pancreatins stendur.

Trypsin er ólíkur próteasi, sem getur brotið niður próteinið á frumuhimnunni og frumuræktarflöskunum. Með því að brjóta niður próteinið á tilteknum stað brotnar próteinið á mótum próteinanna niður og frumurnar verða kúlulaga vegna spennunnar í innri frumubeinagrindinni og skilja þannig frumurnar að. Hraði trypsínmeltunar er lykilskref í frumuræktun: óhóflega melt frumurusl eykst, svartur hrúður eykst, frumur falla í sundur, sem hefur alvarlega áhrif á lífvænleika frumna, og sumar frumur fljóta og missa með trypsíninu sem er fargað; melting Ófullnægjandi, erfitt er að blása frumur niður úr flöskuveggnum, endurtekin pípettrun mun einnig skaða lífvænleika frumna.

How to control the digestion time of trypsin in the cell culture flasks

Mismunandi vefir eða frumur bregðast mismunandi við verkun briskirtils. Virkni dreifðra frumna í brisi er einnig tengd styrkleika þess, hitastigi og virknitíma. Þegar pH er 8,0 og hitastigið er 37 er verkunargeta brislausnarinnar tiltölulega sterk. Þegar briskirtils er notað skal stjórna styrk, hitastigi og tíma til að forðast frumuskemmdir af völdum ofmeltingar. Vegna þess að Ca2+, Mg2+, sermi og prótein geta dregið úr virkni briskirtils, ætti að nota BSS án Ca2+ og Mg2+ þegar brislausn er útbúin, eins og D-Hanks lausn. Þegar melting er hætt skaltu nota ræktunarefni sem inniheldur sermi eða trypsínhemla til að stöðva áhrif briskirtils á frumur.

Að auki, ef um nýkeypta frumu er að ræða, geturðu fyrst notað lágan styrk af trypsíni til að finna út meltinguna. tíma, og athugaðu hvort frumurnar séu kringlóttar á hverri mínútu og gerðu skrá. Í stuttu máli, þegar frumurnar eru teknar í frumuræktunarflöskur, verður að stjórna trypsínmeltunartímanum til að viðhalda lífvænleika frumunnar.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.