English
Frumugreining er mikilvæg tilraunaaðferð til að breyta gegndræpi og virkni frumna. Það þýðir að eftir að fruma er sýkt af vírus notar vírusinn næringarefnin í hýsilfrumunni til að búa til eigin afkvæmi og síðan eyðileggur vírusafkvæmið hýsilfrumuna og losnar út úr frumunum. Í frumulýsutilraunum eru frumuræktunarflöskur algeng neysluvara. Skrefin fyrir frumugreiningu eru sem hér segir:
1. Hellið ræktunarmiðlinum út og spennið frumuræktunarflöskuna á hvolf á gleypið pappír þannig að gleypið pappír gleypi ræktunarefnið (eða setjið flöskuna upprétta í smá stund til að leyfa afgangnum af ræktunarefninu að flæða í botn flöskunnar og notaðu síðan pípettu til að soga hana í burtu ).
2. Bætið 3ml af 4℃ forkældu PBS (0,01M pH7.2～7.3) í hverja flösku af frumum. Leggðu frumurnar flatar og hristu varlega í 1 mín til að þvo frumurnar og fargaðu síðan þvottalausninni. Endurtaktu ofangreinda aðgerð tvisvar og þvoðu frumurnar þrisvar sinnum til að skola ræktunarvökvann í burtu. Fleygðu PBS og settu ræktunarflöskuna á ís.
3. Bætið 10ul PMSF (100mM) við 1ml leysistuðpúða, hristið vel og setjið á ís. (PMSF verður að hrista þar til engir kristallar eru til áður en blandað er við leysislausnina.)
4. Bætið 400 ul af lýsisbuffi sem inniheldur PMSF í hverja flösku af frumum og lýsið á ís í 30 mínútur. Til þess að greina frumurnar að fullu verður að hrista flöskuna oft.
5. Eftir leysingu, notaðu hreina sköfu til að skafa frumurnar á annarri hlið ræktunarflöskunnar (aðgerðin ætti að vera hröð) og notaðu síðan byssu til að færa frumuruslið og lýsa í 1,5 ml skilvindurör. (Öll aðgerðin ætti að fara fram á ís eins mikið og hægt er.)
6. Miðflótta við 12000 snúninga á mínútu við 4°C í 5 mín. (Kveiktu fyrirfram á skilvindu til að forkæla)
7. Flytið skilvindufljótandi vökvann yfir í skilvindurör í 0,5 mín og geymið það við -20°C.
Frumuræktunarflöskur eru ekki aðeins notaðar fyrir frumulýsutilraunir, heldur einnig fyrir meðalstóra frumu- og vefjaræktun á rannsóknarstofu, svo sem Vero frumur , HEK 293 frumur, CAR-T frumur, CHO frumur, skordýrafrumur osfrv.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.