Hogyan használjunk sejttenyésztő lombikokat E. coli telepek kimutatására

Wed May 18 11:31:04 CST 2022

A coliform baktériumok Gram-negatív nem bacillus baktériumok csoportját jelentik, amelyek képesek laktózt fermentálni, savat és gázt termelni, aerob és fakultatív anaerob baktériumokat. A gyakorlati alkalmazásokban gyakran használják annak jelzésére, hogy az élelmiszer szennyezett-e széklettel. Az összes észlelési módszer közül a sejttenyésztő lombik érzékelési módszer a leggyakrabban használt módszer. A művelet lépései a következők:

1. Mintavétel és hígítás

(1) Az aszeptikus módszer szerint tegyen 25 g (vagy 25 ml) vizsgálati mintát egy 225 ml steril vizet tartalmazó sejttenyésztő lombikba (előre beállított megfelelő számú üveggyöngy a lombikban) vagy egy sterilizált mozsárba, és alaposan rázzuk fel. Vagy őrölje meg, hogy egyenletes 1:10 hígítást kapjon. A legjobb, ha steril homogenizátort használunk szilárd mintákhoz, és centrifugáljuk 800010000 fordulat/perc sebességgel 1 percig, hogy 1:10 arányú hígítást készítsünk.

(2) Használjon 1 ml-es steril szívószálat 1 Ml 1:10-es hígításhoz öntsük egy 9 ml steril vizet tartalmazó kémcsőbe, rázzuk össze és keverjük össze, hogy 1:100 hígítást kapjunk, cseréljük ki 1 ml-es steril szívószállal, nyomjuk meg A fenti műveleteket egymás után 10-szeres sorozathígításokkal végezzük .

(3) Az élelmiszer-higiéniai követelményeknek vagy a vizsgálati minták szennyezettségének becslése szerint válasszon három hígítást, és oltson be 3 csövet minden egyes hígításhoz. Közvetlenül a mintával is beoltható.

2. A laktóz kezdeti fermentációs tesztje

Ezt általában hipotetikus tesztelésnek nevezik. Célja, hogy ellenőrizze a mintát, hogy vannak-e olyan baktériumok, amelyek a laktózt gáztermelés céljából fermentálják. A vizsgálandó mintát a laktóz epesó fermentációs csőbe oltjuk, a kettős laktóz epesó fermentációs csövet az 1 ml feletti inokulumhoz használjuk; az egyetlen laktóz epesó fermentációs csövet az 1 ml-hez és 1 ml-nél kisebb mennyiséghez használják. Oltson be 3 csövet minden hígításhoz, és helyezze őket 36±1℃-os inkubátorba 24±2 órára. Ha az összes laktóz-epesó fermentációs cső nem termel gázt, az negatívnak tekinthető a coliform baktériumokra nézve. Ha van gáztermelés, akkor kövesse az alábbi eljárást.

3. Elválasztási tenyészet A gáztermelő fermentációs csöveket csíkozzuk, eozin-metilénkék agarlemezekre oltjuk, majd inkubátorban tenyésztjük 36±1°C-on 18-24 órán keresztül. Ezután megfigyeltük a telepmorfológiát, és Gram-festést, mikroszkópos vizsgálatot és újrafermentációs tesztet végeztünk.

4. Laktóz kettős fermentációs teszt

How to use cell culture flasks to detect E. coli colonies

Az úgynevezett megerősítő teszt, amelynek célja annak bizonyítása, hogy a kémcsőből izolált Gram-negatív nem bacillus baktériumok, amelyek a kezdeti laktóz fermentációs tesztben pozitívak voltak, valóban képesek a laktózt gáztermelésre fermentálni. A fent említett szelektív EMB táptalajon válasszon ki 1-2 gyanús coliform telepet Gram-festéshez, és ezzel egyidejűleg oltsa be a laktóz fermentációs csöveket, és helyezze őket 36±l°C-os inkubátorba 24±2 órára a gáz megfigyelésére. Termelés. . Ahol a laktóz fermentációs cső gázt termel, és a Gram-folt negatív, a Bacillus-mentes baktériumokról számoltak be, mint a coliformokra nézve; ahol a laktóz fermentációs cső nem termel gázt, vagy a Gram-folt pozitív, akkor a coliformok esetében negatívként jelentik.

A fenti

műveleti módszer az E. coli csoport indikátorainak kimutatására. Az Escherichia coli fontos mutató, amely tükrözi, hogy az élelmiszer szennyezett-e. A kimutatási módszer elsajátítása alapvető készség, amellyel minden élelmiszer-ellenőrnek rendelkeznie kell.cell culture flaskssejttenyésztő lombik

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.