Hogyan szabályozható a tripszin emésztési ideje a sejttenyésztő lombikban

Wed May 18 11:30:10 CST 2022

A sejttenyésztés magában foglalja a sejtek beoltását, tenyésztését, begyűjtését és egyéb folyamatokat. A sejtkultúra-lombikok sejtek bizonyos mértékig megnőttek, és a sejteket be kell gyűjteni. Ekkor a lombik falán lévő sejteket tripszinnel kell emészteni, majd begyűjteni. A pankreatin alkalmazása során ellenőrizni kell az emésztési időt.

A tripszin egy heterogén proteáz, amely képes lebontani a sejtmembránon és a sejttenyésztő lombikon lévő fehérjét. A fehérje meghatározott helyen történő lebontásával a fehérjék közötti találkozási pontban lévő fehérje lebomlik, és a sejtek belső citoszkeletonjuk feszültsége miatt gömb alakúvá válnak, ezáltal a sejtek szétválnak. A tripszin emésztés mértéke kulcsfontosságú lépés a sejttenyészetben: megnövekszik a túlzottan emésztett sejttörmelék, megnövekszik a fekete söpredék, a sejtek darabokban esnek le, ami súlyosan befolyásolja a sejtek életképességét, és egyes sejtek lebegnek és veszítenek az eldobott tripszinnel; emésztés Nem kielégítő, a sejteket nehéz lefújni a palack faláról, az ismételt pipettázás szintén károsítja a sejtek életképességét.

How to control the digestion time of trypsin in the cell culture flasks

A különböző szövetek vagy sejtek eltérően reagálnak a pankreatin hatására. A pankreatinnal diszpergált sejtek aktivitása összefügg a koncentrációjával, hőmérsékletével és hatásidejével is. Amikor a pH 8,0 és a hőmérséklet 37, a pankreatin oldat hatásos képessége viszonylag erős. Pancreatin alkalmazásakor a koncentrációt, a hőmérsékletet és az időt ellenőrizni kell, hogy elkerüljük a túlemésztés okozta sejtkárosodást. Mivel a Ca2+, Mg2+, a szérum és a fehérje csökkentheti a pankreatin aktivitását, a Ca2+ és Mg2+ nélküli BSS használata javasolt a pankreatin oldat, például a D-Hanks oldat elkészítésekor. Az emésztés befejezésekor használjon szérumtartalmú táptalajt vagy tripszin inhibitort, hogy megállítsa a pankreatin sejtekre gyakorolt ​​hatását.

Ezenkívül, ha újonnan vásárolt sejtről van szó, először alacsony koncentrációjú tripszint használhat az emésztés kiderítésére. időt, és figyelje meg, hogy a cellák minden percben kerekek-e, és készítsen feljegyzést. Röviden, amikor a sejteket begyűjtjük a sejttenyésztő lombik-ban, a tripszin emésztési idejét ellenőrizni kell a sejt életképességének fenntartása érdekében.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.