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Le passage cellulaire fait référence au processus de division de la culture en petites parties, de réensemencement dans un autre récipient de culture, puis de culture. Flacons de culture cellulaire sont un consommable courant dans le processus de passage, alors quelles sont les étapes spécifiques du passage cellulaire ?
1. Sortez les flacons de culture cellulaire de l'incubateur, vaporisez de l'alcool à 75 % sur la surface de la bouteille avec une bombe aérosol d'alcool et transférez-le sur la table ultra-propre.
2. Ouvrez le couvercle, aspirez doucement l'ancien milieu de culture, ajoutez une quantité appropriée de tampon PBS pour laver 1 à 2 fois avec une pipette Pasteur et jetez le tampon PBS.
3. Utilisez une pipette pour ajouter 1 à 2 ml de pancréatine et secouez la "croix" pour que la pancréatine entre complètement en contact avec les cellules.
4. Transférer le flacon de culture cellulaire avec de la trypsine au stade du microscope inversé et observer la digestion cellulaire au microscope. Lorsque les cellules deviennent rondes et tombent en grande quantité, préparez-vous à terminer la digestion. Vaporisez la surface de la bouteille avec de l'alcool à 75 % et transférez-la dans le super Net Taiwan.
5. Utilisez une pipette (ou une pipette Pasteur) pour ajouter une quantité égale de milieu contenant du sérum pour terminer la digestion. Pipeter soigneusement pour permettre aux cellules de tomber complètement.
6. Transférez le liquide mélangé dans la bouteille dans un tube à centrifuger, équilibrez-le et centrifugez pendant environ 5 minutes.
7. Après la centrifugation, vaporisez la surface du tube à centrifuger avec une bombe aérosol d'alcool, transférez-le sur la table ultra-propre, ouvrez le couvercle et versez le surnageant dans le réservoir à déchets.
8. Ajouter un volume approprié de milieu contenant du sérum et pipeter délicatement avec une pipette ou une pipette Pasteur pour obtenir une suspension cellulaire.
9. Diviser la suspension cellulaire dans 2 flacons de culture stériles propres (ou plus), ajouter la quantité appropriée de milieu de culture et fermer le couvercle.
10. Placer le flacon de culture aliquoté sur la platine du microscope inversé et observer l'état de la cellule. Le nombre de cellules doit être garanti. Un nombre trop petit affectera la croissance.
11. Marquez la bouteille pour indiquer le temps de passage, le type de cellule, l'opérateur et d'autres informations. Avant de le mettre dans l'incubateur, vaporisez à nouveau la surface du corps de la bouteille avec de l'alcool, nettoyez la table d'opération, essuyez la surface de la table ultra-propre avec de l'alcool à 75 % et nettoyez les déchets liquides et les ordures.
Le ci-dessus est le processus spécifique d'utilisation de flacons de culture cellulaire pour le passage des cellules. Notez que vous devez porter des vêtements stériles, des gants et des masques stériles pendant l'opération et faire attention aux opérations aseptiques tout au long du processus pour éviter la contamination des cellules.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.