Achten Sie bei der Verwendung von Zellkulturflaschen auf diese drei Punkte

Thu May 19 09:31:17 CST 2022

Das Zellkulturflasche ist eine Art Zellverbrauchsmaterial, das in der Lebensforschung und Praxis eingesetzt wird. Es wird hauptsächlich für die Kultivierung von adhärenten Zellen verwendet. Bei der Anwendung ist die richtige Bedienweise die Voraussetzung für einen reibungslosen Versuchsablauf. Beachten Sie bei der Verwendung dieses Verbrauchsmaterials Folgendes: Wie spät ist es:

1. Zum Deckel: Den Deckel der Einweg-Zellkulturflasche nicht zu fest anziehen, um den Gasaustausch zu gewährleisten. HEPES ist ein nichtionischer Puffer mit guter Pufferkapazität im pH-Bereich von 7,2–7,4, aber er ist sehr teuer und kann bei hohen Konzentrationen für einige Zellen toxisch sein. HEPES-Puffer kann mit niedrigem Natriumcarbonat (0,34 g/l) verwendet werden, um den durch die Zugabe von HEPES verursachten Anstieg des osmotischen Drucks auszugleichen. Unter diesen Kulturbedingungen sollte der Deckel der Einweg-Zellkulturflasche festgezogen werden, um zu verhindern, dass die kleine Menge an Karbonat in der Kulturlösung in die Luft gelangt. Die meisten Kulturflüssigkeiten enthalten Phenolrot als pH-Indikator, saure Kulturflüssigkeiten sind orange-gelb und alkalische Kulturflüssigkeiten sind dunkelrot.

Pay attention to these three points when using cell culture flasks

2. „Wachstumshöhle“ reduzieren: Die meisten Anwender verwenden keine vorbeschichteten Einweg-Zellkulturflaschen, sondern gewöhnliche Einweg-Zellkulturflaschen. Die Oberflächenumgebung ist für die mesenchymale Stammzellenpaste in der serumfreien Kulturumgebung nicht förderlich. Wand. Stellen Sie es für 5-10 Minuten auf 37°C, um die adhäsionsfördernden Substanzen im Kulturmedium besser mit dem Boden der Einweg-Zellkulturflasche zu verbinden, was die Adhäsionsfähigkeit von mesenchymalen Stammzellen erhöht und die Wahrscheinlichkeit von "Wachstumslöchern" verringert ".

3. Zellaufschluss: Flasche aufrecht stellen und Nährmedium absaugen. Wenn sich mehr abgeblätterte Zellen im Kulturmedium befinden, bedeutet dies, dass die Zellen jetzt leicht abfallen können. Einfach 1ml PBS+EDTA (0,02%) zugeben und die Kulturflasche leicht hin und her schütteln bis Zellen komplett abfallen, 10ml MEM zugeben, gut mischen, nicht pipettieren, auf 2 Flaschen aufteilen, wenn die Zellen ohne Überwucherung abfallen, Fügen Sie einfach 5 ml MEM hinzu, keine separate Verpackung. Wenn die Zellen in der Flasche fest haften, der Mediumüberstand keine Zelltrümmer aufweist und die Zellen zu über 80 % überwachsen sind, saugen Sie das Medium ab, fügen Sie 5 ml PBS + EDTA (0,02 %) hinzu, schütteln Sie es schnell leicht und kultivieren Sie es aufrecht Aspirieren Sie die Flasche, fügen Sie 1 ml 0,05 % Pankreatin hinzu, verdauen Sie bei 37 °C nicht länger als 3 Minuten, und die Zellen werden vollständig verdaut und abgeschält. Nehmen Sie 10 ml Kulturmedium heraus und fügen Sie es hinzu, um es vorsichtig zu pipettieren und zu mischen, und teilen Sie es in 2 Flaschen auf.

Zellen reagieren sehr empfindlich auf die Wachstumsumgebung. Als häufiger verwendetes Verbrauchsmaterial sollte Zellkulturflaschen sorgfältig verwendet werden und die vorgeschriebenen Verfahren strikt befolgen, um unsachgemäße Operationen zu vermeiden, die das Zellwachstum beeinträchtigen.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.