Anwendung von Zellkulturflaschen in der Zellpassage

Thu May 19 09:26:42 CST 2022

Zellkulturflaschenhaben geraden Hals, Torticollis, Winkelhals, Dreieck, Rechteck usw. nach verschiedenen Formen. Die Spezifikationen umfassen 25 ml, 75 ml, 175 ml und 250 ml. Kleinere Größen werden hauptsächlich für die Zellpassage, die Konservierung von Zellen und die Bereitstellung von Zellen für Experimente usw. verwendet.

Nachdem die Zellen in der Zellkulturflasche zu einer dichten Monoschicht herangewachsen sind, werden sie im Grunde genommen gesättigt. Damit die Zellen weiter wachsen und die Zellzahl erhöhen können, müssen sie subkultiviert (rekultiviert) werden. Subkultur ist auch eine Möglichkeit, Zellarten zu erhalten. Gleichzeitig ist es ein notwendiger Prozess für verschiedene Experimente mit kultivierten Zellen. Suspendierte Zellen können direkt abgetrennt werden, während anhaftende Zellen verdaut werden müssen, bevor sie abgetrennt werden können. Die konkreten Schritte lauten wie folgt:

1. Entsorgen Sie das ursprüngliche Kulturmedium in der mit Zellen gefüllten Zellkulturflasche.

2. Fügen Sie 0,5–1 ml 0,25 % Pankreatinlösung hinzu, sodass die Zellen am Boden der Flasche in die Lösung eingetaucht sind.

Application of cell culture flasks in cell passage

3. Setzen Sie einen Gummistopfen auf die Flasche und legen Sie sie unter ein inverses Mikroskop, um die Zellen zu beobachten. Im Laufe der Zeit neigten die ursprünglich anhaftenden Zellen allmählich dazu, rund zu werden, und das Pankreatin wurde verworfen, als die Zellen noch nicht geschwommen waren, und 10 ml Kulturmedium wurden zugegeben, um den Verdau zu beenden. Die Beobachtung der Verdauung kann auch mit bloßem Auge erfolgen. Wenn der Boden der Flasche weiß zu sehen ist und feine Nadelstiche erscheinen, kann der Aufschluss beendet werden. Im Allgemeinen beträgt die Aufschlusszeit bei Raumtemperatur etwa 1–3 Minuten.

4. Blasen Sie die adhärenten Zellen mit einer Pipette in eine Suspension, teilen Sie sie in zwei bis drei Flaschen auf, verschließen Sie die Kulturlösung mit einem Gummistopfen und stellen Sie sie bei 37 °C auf, um die Kultivierung fortzusetzen. Beobachten Sie das anhaftende Wachstum am nächsten Tag.

Das Obige ist die Anwendung von Zellkulturflaschen bei der Zellpassage. Das Herstellungsverfahren der Verdauungslösung ist wie folgt: Wiegen Sie 0,25 g Trypsin (Aktivität 1:250), fügen Sie 100 ml Ca2+, Mg2+-freie Hank-Lösung zum Auflösen hinzu, filtern Sie, sterilisieren Sie durch Filtration, lagern Sie bei 4°C und kehren Sie zu einer Temperatur von 37 zurück °C vor Gebrauch. Der Pankreatinlösung kann auch EDTA zugesetzt werden, damit die Endkonzentration 0,02 % erreicht.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.