Sut i ddefnyddio fflasgiau meithrin celloedd i ganfod cytrefi E. coli

Wed May 18 14:19:10 CST 2022

Mae bacteria colifform yn cyfeirio at grŵp o facteria gram-negyddol nad ydynt yn bacilws sy'n gallu eplesu lactos, cynhyrchu asid a nwy, anaerobig aerobig a chyfadranol. Mewn cymwysiadau ymarferol, fe'i defnyddir yn aml fel dangosydd a yw bwyd wedi'i halogi gan feces. Ymhlith yr holl ddulliau canfod, y defnydd o fflasgiau diwylliant cell ar gyfer canfod yw'r un a ddefnyddir amlaf. Mae'r camau gweithredu fel a ganlyn:

1. Samplu a gwanhau

(1) Yn ôl y dull aseptig, rhowch 25g (neu 25mL) o'r sampl prawf mewn fflasg meithrin cell sy'n cynnwys dŵr di-haint 225mL (rhif priodol o gleiniau gwydr yn y fflasg) neu forter wedi'i sterileiddio, a'i ysgwyd yn drylwyr. Neu falu i wneud gwanediad unffurf o 1:10. Mae'n well defnyddio homogenizer di-haint ar gyfer samplau solet a centrifuge ar gyflymder o 800010000r/min am 1 munud i wneud gwanediad 1:10.

(2) Defnyddiwch wellt di-haint 1mL i sugno 1Ml o wanhau 1:10, ei arllwys i mewn i diwb prawf sy'n cynnwys 9mL o ddŵr di-haint, ysgwyd a chymysgu i wneud gwanhad 1:100, rhoi gwellt di-haint 1mL yn ei le, pwyswch Mae'r gweithrediadau uchod yn cael eu gwneud yn olynol 10 gwaith gwanhau cyfresol .

(3) Yn ôl y gofynion hylendid bwyd neu'r amcangyfrif o halogiad y samplau prawf, dewiswch dri gwanhad a brechu 3 thiwb ar gyfer pob gwanediad. Gellir hefyd ei frechu'n uniongyrchol gyda'r sampl.

2. Prawf eplesu cychwynnol o lactos

Cyfeirir at hyn yn gyffredin fel profion damcaniaethol. Ei bwrpas yw gwirio'r sampl am facteria sy'n eplesu lactos i gynhyrchu nwy. Mae'r sampl sydd i'w brofi yn cael ei frechu i mewn i'r tiwb eplesu halen bustl lactos, defnyddir y tiwb eplesu halen bustl lactos dwbl ar gyfer yr inocwlwm uwchlaw 1 mL; defnyddir y tiwb eplesu halen bustl lactos sengl ar gyfer yr 1 mL a llai nag 1 mL. Brechwch 3 thiwb ar gyfer pob gwanediad a'u rhoi mewn deorydd 36 ± 1 ℃ am 24 ± 2h. Os nad yw'r holl diwbiau eplesu halen bustl lactos yn cynhyrchu nwy, gellir dweud ei fod yn negyddol ar gyfer bacteria colifform. Os oes nwy yn cynhyrchu, yna Dilynwch y drefn isod.

3. Diwylliant gwahanu

Cafodd y tiwbiau eplesu sy'n cynhyrchu nwy eu streipio a'u brechu ar blatiau agar glas eosin methylene, a'u meithrin mewn deorydd ar 36 ± 1 ° C am 18-24 awr. Yna, arsylwyd morffoleg y nythfa a chynhaliwyd staenio Gram, archwiliad microsgopig a phrawf ail-eplesu.

How to use cell culture flasks to detect E. coli colonies

4. Prawf eplesu dwbl lactos

Y prawf cadarnhau fel y'i gelwir, y mae ei ddiben yw profi y gall y bacteria gram-negyddol nad yw'n bacilws ynysu o'r tiwb prawf a oedd yn bositif yn y prawf eplesu lactos cychwynnol yn wir eplesu lactos i gynhyrchu nwy. Ar y cyfrwng EMB dethol a grybwyllir uchod, dewiswch 1 i 2 gytrefi colifform amheus ar gyfer staenio Gram, a brechu tiwbiau eplesu lactos ar yr un pryd, a'u rhoi mewn deorydd 36 ± l ° C am 24 ± 2 awr i arsylwi ar y nwy. cynhyrchu. . Pan fydd y tiwb eplesu lactos yn cynhyrchu nwy a'r staen gram yn negyddol, adroddir bod bacteria di-Bacillus yn bositif ar gyfer colifformau; lle nad yw'r tiwb eplesu lactos yn cynhyrchu nwy neu mae'r staen gram yn bositif, adroddir ei fod yn negyddol ar gyfer colifformau.

Yr uchod yw'r dull gweithredu o ddefnyddio cell fflasgiau i ganfod dangosyddion grŵp E. coli. Mae Escherichia coli yn ddangosydd pwysig sy'n adlewyrchu a yw bwyd wedi'i halogi. Mae meistroli'r dull canfod yn sgil sylfaenol y dylai pob arolygydd bwyd feddu arno.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.