Як выкарыстоўваць колбы для культуры клетак для выяўлення калоній E. coli

Wed May 18 14:38:46 CST 2022

Коліформныя бактэрыі ставяцца да групы грамотріцательных небациллезных бактэрый, якія могуць ферментаваць лактозу, выпрацоўваць кіслату і газ, аэробныя і факультатыўна-анаэробныя. У практычных ужываннях ён часта выкарыстоўваецца як індыкатар таго, ці забруджаная ежа фекаліямі. Сярод усіх метадаў выяўлення, выкарыстанне колбы для культуры клетак для выяўлення з'яўляецца найбольш часта выкарыстоўваным. Кропкі аперацыі наступныя:

1. Адбор проб і развядзенне

(1) У адпаведнасці з асептычным метадам пакладзеце 25 г (або 25 мл) доследнага ўзору ў колбу для культуры клетак, якая змяшчае 225 мл стэрыльнай вады (папярэдне зададзеная адпаведная колькасць шкляных шарыкаў у колбе) або стэрылізаваны ступку, і старанна падтрасіце. Або здрабніць, каб атрымалася раўнамернае развядзенне 1:10. Лепш за ўсё выкарыстоўваць стэрыльны гомогенизатор для цвёрдых узораў і цэнтрыфугаваць на хуткасці 800010000r/min на працягу 1 хвіліны, каб зрабіць развядзенне 1:10.

(2) Выкарыстоўвайце стэрыльную саломінку аб'ёмам 1 мл рассмоктваць 1 мл развядзення 1:10, пераліць у прабірку з 9 мл стэрыльнай вады, узбоўтаць і змяшаць, каб атрымаць развядзенне 1:100, замяніць стэрыльнай саломінкай 1 мл, націснуць. Вышэйпаказаныя аперацыі паслядоўна выконваюцца 10-кратным серыйным развядзеннем. .

(3) У адпаведнасці з патрабаваннямі гігіены харчовых прадуктаў або ацэнкай забруджанасці доследных узораў, абярыце тры развядзення і пасейце 3 прабіркі для кожнага развядзення. Яго таксама можна пасеяць непасрэдна з узорам.

2. Пачатковы тэст на закісанне лактозы

Гэта звычайна называюць гіпатэтычным тэставаннем. Яго мэта - праверыць узор на наяўнасць бактэрый, якія ферментуюць лактозу з вылучэннем газу. Узор для тэставання засяваюць у прабірку для ферментацыі жоўцевай солі лактозы, падвойную прабірку для ферментацыі жоўцевай солі лактозы выкарыстоўваецца для пасева больш за 1 мл; адна прабірка для ферментацыі жоўцевай солі лактозы выкарыстоўваецца для 1 мл і менш за 1 мл. Пасейце 3 прабіркі для кожнага развядзення і змесціце іх у інкубатар пры тэмпературы 36±1℃ на 24±2 гадзіны. Калі ўсе трубкі для ферментацыі соляў лактозы жоўці не выпрацоўваюць газ, гэта можа быць паведамлена як адмоўнае для палочных бактэрый. Калі адбываецца выпрацоўка газу, выконвайце наступную працэдуру.

3. Культура падзелу

Фактыральныя прабіркі, якія ўтвараюць газ, наносілі прожылкамі і засявалі на пласцінкі з агарам з метиленовым сінім эозину і культывавалі ў інкубатары пры 36±1°C на працягу 18-24 гадзін. Затым назіралі за марфалогіяй калоніі і выконвалі афарбоўку па Граму, мікраскапічнае даследаванне і тэст на паўторную ферментацыю.

How to use cell culture flasks to detect E. coli colonies

4. Тэст на падвойнае закісанне лактозы

Так званы тэст на пацверджанне, мэта якога - даказаць, што грамотріцательные небактэрыйныя бактэрыі, вылучаныя з прабіркі, якія былі станоўчымі ў першапачатковым тэсте на закісанне лактозы, сапраўды могуць ферментаваць лактозу з утварэннем газу. На вышэйзгаданым селектыўным асяроддзі ЭМВ абярыце ад 1 да 2 падазроных калоній палачкі для афарбоўвання па Граму і адначасова пасейце прабіркі для ферментацыі лактозы і змесціце іх у інкубатар пры 36±1°C на 24±2 гадзіны для назірання за газам. вытворчасці. . Калі прабірка для ферментацыі лактозы выпрацоўвае газ, а афарбоўка па Граму адмоўная, бактэрыі, свабодныя ад Bacillus, лічацца станоўчымі на палачкі; калі прабірка для ферментацыі лактозы не выпрацоўвае газ або пляма па Граму станоўчае, гэта паведамляецца як адмоўнае для палачак.

Вышэй прыведзены метад працы з выкарыстаннем колбы для культуры клетак для выяўлення індыкатараў групы E. coli. Кішачная палачка з'яўляецца важным паказчыкам, які адлюстроўвае, ці заражаная ежа. Авалоданне метадам выяўлення - гэта базавы навык, якім павінен валодаць кожны харчовы інспектар.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.