Як кантраляваць час пераварвання трыпсінаў у колбах для культуры клетак

Wed May 18 14:38:17 CST 2022

Культура клетак ўключае ў сябе інакуляцыю клетак, культывацыю, збор і іншыя працэсы. Клеткі ў колбы для культуры клетак выраслі да пэўнай ступені, і клеткі трэба сабраць. У гэты час клеткі на сценцы колбы трэба пераварыць трыпсінам, а затым сабраць. Падчас выкарыстання панкрэатыну неабходна кантраляваць час пераварвання.

трыпсін - гэта гетэрагенная протеаза, якая можа дэградаваць бялок на клеткавай мембране і ў колбах для культуры клетак. Пры дэградацыі бялку ў пэўным месцы, бялок на стыку паміж вавёркамі дэградуе, і клеткі становяцца сферычнымі з-за нацяжэння іх унутранага цыташкілета, тым самым аддзяляючы клеткі. Ступень пераварвання трыпсінаў з'яўляецца ключавым этапам у культуры клетак: павялічваецца празмерна перавараны клетачны смецце, павялічваецца чорная пена, клеткі будуць адпадаць на кавалкі, што сур'ёзна ўплывае на жыццяздольнасць клетак, і некаторыя клеткі плаваюць і губляюць разам з выкінутым трыпсінам; страваванне недастатковае, клеткі цяжка сцякаць са сценкі бутэлькі, шматразовае піпетаванне таксама пашкоджвае жыццяздольнасць клетак.

How to control the digestion time of trypsin in the cell culture flasks

Розныя тканіны або клеткі па-рознаму рэагуюць на дзеянне панкрэатыну. Актыўнасць диспергированных клетак панкрэатыну таксама звязана з яго канцэнтрацыяй, тэмпературай і часам дзеяння. Калі рн роўны 8,0 і тэмпература роўная 37, дзеянне раствора панкрэатыну адносна моцнае. Пры выкарыстанні панкрэатыну варта кантраляваць канцэнтрацыю, тэмпературу і час, каб пазбегнуць пашкоджання клетак, выкліканага празмерным пераварваннем. Паколькі Ca2+, Mg2+, сыроватка і бялок могуць зніжаць актыўнасць панкрэатыну, пры падрыхтоўцы раствора панкрэатыну, напрыклад, раствора D-Хенкса, варта выкарыстоўваць BSS без Ca2+ і Mg2+. Пры спыненні пераварвання выкарыстоўвайце культуральную асяроддзе, якая змяшчае сыроватку, або інгібітар трыпсінаў, каб спыніць дзеянне панкрэатыну на клеткі.

Акрамя таго, калі гэта нядаўна набытая клетка, вы можаце спачатку выкарыстоўваць нізкую канцэнтрацыю трыпсіну, каб даведацца аб пераварванні час, і назіраць, ці круглыя ​​клеткі кожную хвіліну, і зрабіць запіс. Карацей кажучы, пры зборы клетак у колбы для культуры клетак трэба кантраляваць час пераварвання трыпсінаў, каб падтрымліваць жыццяздольнасць клетак.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.