كيفية استخدام قوارير زراعة الخلايا للكشف عن مستعمرات الإشريكية القولونية

Wed May 18 17:47:37 CST 2022

تشير بكتيريا القولون إلى مجموعة من البكتيريا غير العصوية سالبة الجرام والتي يمكنها تخمير اللاكتوز وإنتاج الحمض والغاز والهوائية واللاهوائية الاختيارية. في التطبيقات العملية ، غالبًا ما يستخدم كمؤشر على ما إذا كان الطعام ملوثًا بالبراز. من بين جميع طرق الكشف ، يعد استخدام قوارير زراعة الخلايا للكشف هو الأكثر استخدامًا. خطوات العملية كالتالي:

1. أخذ العينات والتخفيف

(1) وفقًا لطريقة التعقيم ، ضع 25 جم (أو 25 مل) من عينة الاختبار في دورق مزرعة يحتوي على 225 مل من الماء المعقم (محدد مسبقًا العدد المناسب من الخرز الزجاجي في القارورة) أو ملاط ​​معقم ، ورجها جيدا. أو طحن لعمل تخفيف موحد بنسبة 1:10. من الأفضل استخدام مجانس معقم للعينات الصلبة وأجهزة الطرد المركزي بسرعة 8000 10000r / min لمدة دقيقة واحدة لعمل تخفيف بنسبة 1:10.

(2) استخدم قشة معقمة سعة 1 مل لامتصاص 1 مل من التخفيف بنسبة 1:10 ، اسكبه في أنبوب اختبار يحتوي على 9 مل من الماء المعقم ، وقم برجه واخلطه لعمل تخفيف بنسبة 1: 100 ، واستبدله بشفاط معقم بسعة 1 مل ، واضغط. .

(3) وفقًا لمتطلبات النظافة الغذائية أو تقدير تلوث عينات الاختبار ، حدد ثلاث تخفيفات وقم بتلقيح 3 أنابيب لكل تخفيف. كما يمكن تلقيحها مباشرة مع العينة.

2. اختبار التخمير الأولي للاكتوز

يشار إلى هذا عادة باسم الاختبار الافتراضي. والغرض منه فحص العينة بحثًا عن البكتيريا التي تخمر اللاكتوز لإنتاج الغاز. يتم تلقيح العينة المراد اختبارها في أنبوب تخمير ملح اللاكتوز الصفراوي ، ويستخدم أنبوب تخمير الملح الصفراوي اللاكتوز المزدوج للقاح الذي يزيد عن 1 مل ؛ يتم استخدام أنبوب تخمير ملح اللاكتوز الصفراوي الأحادي في 1 مل وأقل من 1 مل. تلقيح 3 أنابيب لكل تخفيف وضعها في حاضنة 36 ± 1 لمدة 24 ± 2 ساعة. إذا كانت جميع أنابيب تخمير ملح اللاكتوز الصفراوية لا تنتج غازات ، فيمكن الإبلاغ عنها على أنها سلبية للبكتيريا القولونية. إذا كان هناك إنتاج للغاز ، فاتبع الإجراء أدناه.

3. ثقافة الفصل

تم وضع خطوط أنابيب التخمير المنتجة للغاز وتلقيحها على ألواح أجار إيوزين ميثيلين الأزرق ، وتم تربيتها في حاضنة عند درجة حرارة 36 ​​± 1 درجة مئوية لمدة 18-24 ساعة. بعد ذلك ، تمت ملاحظة مورفولوجيا المستعمرة وإجراء تلوين غرام وفحص مجهري واختبار إعادة التخمير.

How to use cell culture flasks to detect E. coli colonies

4. اختبار التخمير المزدوج للاكتوز

ما يسمى باختبار التأكيد ، والغرض منه إثبات أن البكتيريا سالبة الجرام غير العصوية المعزولة من أنبوب الاختبار والتي كانت إيجابية في اختبار تخمير اللاكتوز الأولي يمكنها بالفعل تخمير اللاكتوز لإنتاج الغاز. على وسيط EMB الانتقائي المذكور أعلاه ، اختر 1 إلى 2 مستعمرة القولون المشبوهة لتلطيخ غرام ، وقم بتلقيح أنابيب تخمير اللاكتوز في نفس الوقت ، وضعها في حاضنة 36 درجة مئوية لمدة 24 ± 2 ساعة لمراقبة الغاز إنتاج. . عندما ينتج أنبوب تخمير اللاكتوز غازًا وتكون صبغة الجرام سالبة ، يتم الإبلاغ عن البكتيريا الخالية من العصيات كبكتيريا القولونيات ؛ عندما لا ينتج أنبوب تخمير اللاكتوز غازًا أو تكون صبغة الجرام موجبة ، يتم الإبلاغ عنها على أنها سلبية بالنسبة للقولون. الإشريكية القولونية هي مؤشر مهم يعكس ما إذا كان الطعام ملوثًا أم لا. إتقان طريقة الكشف هو مهارة أساسية يجب أن يمتلكها كل مفتش طعام.

قوارير زراعة الخلاياcell culture flasks to detect E. coli group indicators. Escherichia coli is an important indicator that reflects whether food is contaminated. Mastering the detection method is a basic skill that every food inspector should possess.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.