استفاده از فلاسک های کشت سلولی در پاساژ سلولی

1. محیط کشت اصلی را در فلاسک کشت سلولی پر از سلول دور بریزید.دارای گردن راست، تورتیکولی، گردن زاویه، مثلث، مستطیل و غیره با توجه به اشکال مختلف. مشخصات شامل 25 میلی لیتر، 75 میلی لیتر، 175 میلی لیتر و 250 میلی لیتر است. اندازه های کوچکتر بیشتر برای عبور سلولی، حفظ سلول ها و تهیه سلول ها برای آزمایش و غیره استفاده می شود. اشباع شده برای اینکه سلول ها بتوانند به رشد خود ادامه دهند و تعداد سلول ها را افزایش دهند، باید آنها را زیر کشت (کشت مجدد) کرد. خرده فرهنگ نیز راهی برای حفظ گونه های سلولی است. در عین حال، این یک فرآیند ضروری برای آزمایش های مختلف با استفاده از سلول های کشت شده است. سلول های معلق را می توان به طور مستقیم جدا کرد، در حالی که سلول های چسبنده قبل از جدا شدن باید هضم شوند. مراحل خاص به شرح زیر است:

2. 0.5-1ml محلول پانکراتین 0.25% اضافه کنید، به طوری که سلول های ته بطری در محلول غوطه ور شوند.

3. یک درپوش لاستیکی روی بطری قرار دهید و آن را زیر میکروسکوپ معکوس قرار دهید تا سلول ها را مشاهده کنید. با گذشت زمان، سلول‌های چسبنده اولیه به تدریج به گرد شدن گرایش پیدا کردند و پانکراتین زمانی که سلول‌ها هنوز شناور نشده بودند دور انداخته شد و 10 میلی‌لیتر محیط کشت برای خاتمه هضم اضافه شد. مشاهده هضم را می توان با چشم غیر مسلح نیز انجام داد. هنگامی که ته بطری سفید و سوراخ های ریز ظاهر می شود، هضم می تواند خاتمه یابد. به طور کلی زمان هضم در دمای اتاق حدود 1-3 دقیقه است.

4. از یک پیپت برای دمیدن سلول های چسبنده در سوسپانسیون استفاده کنید، آنها را به دو تا سه بطری تقسیم کنید، محلول کشت را با یک درپوش لاستیکی ببندید و آن را در دمای 37 درجه سانتیگراد قرار دهید تا به کشت ادامه دهید. رشد چسبنده را روز بعد مشاهده کنید.

کاربرد

در پاساژ سلولی است. روش تهیه محلول هضم به شرح زیر است: 0.25 گرم تریپسین (فعالیت 1:250) وزن کنید، 100 میلی لیتر Ca2+، محلول هنک بدون Mg2+ اضافه کنید تا حل شود، فیلتر با فیلتراسیون استریل شود، در دمای 4 درجه سانتیگراد نگهداری شود و به دمای 37 برگردید. درجه سانتی گراد قبل از استفاده همچنین می توان EDTA را به محلول پانکراتین اضافه کرد تا غلظت نهایی به 0.02% برسد.

فلاسک های کشت سلولیcell culture flasks in cell passaging. The preparation method of digestion solution is as follows: Weigh 0.25g trypsin (activity 1:250), add 100ml Ca2+, Mg2+-free Hank’s solution to dissolve, filter Sterilize by filtration, store at 4°C, and return to temperature at 37°C before use. EDTA can also be added to the pancreatin solution to make the final concentration reach 0.02%.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.