Cách đo số lượng tế bào sống trong nhà máy sản xuất tế bào

Wed May 18 13:49:36 CST 2022

A cell factory là cấu trúc một lớp hoặc nhiều lớp của vật tư tiêu hao nuôi cấy tế bào. Trong quá trình nuôi cấy tế bào, chúng ta cần nắm bắt kịp thời trạng thái sinh trưởng của tế bào trước khi tiến hành bước tiếp theo. Số lượng tế bào sống sót có thể được phát hiện bằng cách nhuộm màu xanh trypan. Phương thức hoạt động cụ thể như sau:

1. Đối với các tế bào kết dính, hút môi trường, thêm dung dịch phân hủy và phân hủy trong tủ ấm trong một thời gian thích hợp. Sau khi các tế bào trở nên tròn, quá trình phân hủy được kết thúc bằng cách thêm một thể tích môi trường bằng hoặc lớn hơn thể tích của chất phân hủy. Sau khi ly tâm, huyền phù tế bào được tạo thành với môi trường nuôi cấy;

2. Lấy 0,5ml dung dịch xanh trypan, 0,3ml PBS và 0,2ml hỗn dịch tế bào và trộn đều. Sau đó, hỗn hợp được để lại trong 1-2 phút. Dùng pipet mao quản hoặc đầu pipet nhỏ 10ul để hút một lượng nhỏ hỗn hợp và bơm vào máy đo huyết cầu;

3. Đếm ít nhất 1000 ô và đếm số ô đã nhuộm màu;

4. Rửa đĩa đếm và khăn phủ bằng nước siêu tinh khiết và etanol 75%;

5. Tế bào bình thường sẽ không bị nhuộm màu, chỉ sau khi tế bào chết đi, tính thấm của màng tế bào lớn hơn, màu xanh trypan xâm nhập vào tế bào, tế bào xuất hiện màu xanh lam. Không nên để hỗn hợp quá lâu, nếu không tế bào sống bình thường cũng ngấm thuốc nhuộm, ảnh hưởng đến độ chính xác của phép đếm;

6. Khả năng sống của tế bào (%) = (tổng số tế bào - số tế bào nhuộm màu) / tổng số tế bào * 100;

7. Giống như phương pháp đếm tế bào, phương pháp nhuộm màu xanh trypan có một sai số lớn. Nó chỉ có thể phát hiện mức độ chết sớm và không thể chỉ ra sự khác biệt giữa nhóm đối chứng và nhóm thực nghiệm.

Trong quá trình nuôi cấy tế bào ở nhà máy tế bào, luôn có một số tế bào bị chết do nhiều nguyên nhân khác nhau. Nắm vững số lượng tế bào sống và khả năng tồn tại của tế bào là thao tác then chốt trong thí nghiệm nuôi cấy tế bào và là cách hiệu quả để đảm bảo tiến độ của thí nghiệm.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.