Thử nghiệm độc tính tế bào của các nhà máy tế bào

Wed May 18 13:48:33 CST 2022

Gây độc tế bào là một sự kiện giết chết tế bào thuần túy do tế bào hoặc hóa chất gây ra mà không dựa trên cơ chế chết tế bào hoặc hoại tử như một cơ chế chết tế bào. Qua thử nghiệm này, có thể phán đoán được liệu nguyên liệu của 1. Phương pháp MTT và XTT: sử dụng hoạt động của các enzym bên trong ty thể, các muối tetrazolium cụ thể có thể được chuyển đổi và sau đó được phát hiện bởi một bộ đọc vi tấm; có chứa các chất không có lợi cho sự phát triển của tế bào hay không. / hoặc quá trình sinh lý của tế bào, chẳng hạn như màng tế bào hoặc cấu trúc xương tế bào, quá trình chuyển hóa tế bào, tổng hợp, phân hủy hoặc giải phóng các thành phần hoặc sản phẩm của tế bào, điều hòa ion và phân chia tế bào và các quá trình khác, dẫn đến rối loạn sự tồn tại, tăng sinh và / hoặc của tế bào chức năng, dẫn đến phản ứng bất lợi. Nói chung, việc kiểm tra xem nhà máy sản xuất tế bào có gây độc tế bào hay không có thể được thực hiện bằng các phương pháp sau:

2. Phương pháp LDH: độc tế bào được phát hiện bằng cách phát hiện hoạt tính của enzym LDH trong dịch nuôi cấy tế bào;

3. Các phương pháp enzym khác: chẳng hạn như phát hiện hoạt động của phosphatase kiềm và acid phosphatase trong phần nổi phía trên;

4. Bộ phân tích sự tăng sinh tế bào: Tế bào bình thường có quá trình trao đổi chất mạnh mẽ và succinate dehydrogenase trong ty thể của chúng có thể làm giảm muối tetrazolium (như MTT, XTT, WST-1, v.v.) thành các chất kết tinh màu tím, lắng đọng xung quanh tế bào và sau đó đọc OD giá trị bằng đầu đọc vi tấm để phát hiện trạng thái tăng sinh tế bào.

5. Phát hiện khả năng sống của tế bào bằng phương pháp phát quang huỳnh quang: Adenylate kinase (AK) tồn tại trong tế bào chất của tất cả các tế bào nhân thực và nhân sơ, và AK có thể kích hoạt ADP để tạo ra ATP. Khi tế bào bị tổn thương, màng tế bào bị tổn thương và AK được giải phóng vào dịch nuôi cấy. Bộ dụng cụ sử dụng luciferase và luciferin để phát ra ánh sáng dưới tác động của ATP và có thể được phát hiện định lượng bằng một thiết bị phát quang hóa học. các hạng mục kiểm tra định kỳ để đảm bảo chất lượng của vật tư tiêu hao nuôi cấy tế bào.

4. Cell Proliferation Analysis Kit: Normal cells have vigorous metabolism, and succinate dehydrogenase in their mitochondria can reduce tetrazolium salts (such as MTT, XTT, WST-1, etc.) to purple crystalline substances , deposited around the cells, and then read the OD value by a microplate reader to detect the cell proliferation state.

5. Detection of cell viability by fluorescein luminescence method: Adenylate kinase (AK) exists in the cytoplasm of all eukaryotic and prokaryotic cells, and AK can activate ADP to generate ATP. When cells are damaged, the cell membrane is damaged and AK is released into the culture supernatant. The kit uses luciferase and luciferin to emit light under the action of ATP, and can be quantitatively detected by a chemiluminescence instrument.

Testing whether a cell factory has cytotoxicity can be carried out in several ways, and this test is also one of the routine testing items to ensure the quality of cell culture consumables.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.