Phát hiện hoạt động của tế bào trong nhà máy tế bào - Phương pháp MTT

Wed May 18 13:47:38 CST 2022

là vật tư tiêu hao thường được sử dụng để nuôi cấy tế bào kết dính. Trong quá trình thí nghiệm, chúng ta cần nắm bắt trạng thái sinh trưởng của các tế bào trong thời gian thực và thực hiện các điều chỉnh phù hợp theo tình hình cụ thể. Khả năng sống của tế bào có thể được phát hiện bằng phương pháp MTT để xác định sự phát triển của tế bào. Phương pháp MTT, còn được gọi là phương pháp so màu MTT, là một phương pháp để phát hiện sự tồn tại và tăng trưởng của tế bào. Nguyên tắc phát hiện là succinate dehydrogenase trong ty thể của tế bào sống có thể khử MTT ngoại sinh thành formazan tinh thể màu xanh tím không tan trong nước và lắng đọng trong tế bào, trong khi tế bào chết không có chức năng này. Dimethyl sulfoxide (DMSO) có thể hòa tan formazan trong tế bào và giá trị hấp thụ ánh sáng của nó có thể được đo bằng xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzym ở bước sóng 570nm, có thể phản ánh gián tiếp số lượng tế bào sống. Trong một phạm vi số ô nhất định, số lượng tinh thể MTT hình thành tỷ lệ thuận với số ô. Phương pháp này đã được sử dụng rộng rãi trong việc phát hiện hoạt tính của một số yếu tố hoạt tính sinh học, sàng lọc thuốc chống khối u quy mô lớn, xét nghiệm độc tính tế bào và xét nghiệm độ nhạy phóng xạ của khối u. Nó được đặc trưng bởi độ nhạy cao và tính kinh tế. cell factory

Trước khi kiểm tra khả năng tồn tại của các tế bào trong nhà máy tế bào, một bước rất quan trọng là xây dựng công thức của MTT. Thông thường, nồng độ MTT trong phương pháp này là 5 mg / ml. Do đó, có thể cân 0,5 g MTT, hòa tan trong 100 ml dung dịch muối đệm photphat (PBS) hoặc môi trường không có màu đỏ phenol, được lọc bằng bộ lọc 0,22 μm để loại bỏ vi khuẩn trong dung dịch và bảo quản ở 4 ° C trong bóng tối. . . Trong quá trình chuẩn bị và bảo quản, cố gắng bọc hộp bằng giấy nhôm.

Khi sử dụng phương pháp MTT để đo hoạt động của tế bào trong nhà máy tế bào, cần lưu ý rằng MTT là chất gây ung thư, vì vậy hãy cẩn thận khi sử dụng. Phương pháp này chỉ có thể được sử dụng để phát hiện số ô tương đối và khả năng tồn tại tương đối, nhưng không phải là số ô tuyệt đối. Khi kiểm tra kết quả bằng đầu đọc vi tấm, để đảm bảo độ tuyến tính của kết quả thí nghiệm, độ hấp thụ MTT phải nằm trong khoảng 0-0,7 càng nhiều càng tốt.

When using the MTT method to measure the cell activity in the cell factory, it should be noted that MTT is carcinogenic, so be careful when using it. This method can only be used to detect relative cell number and relative viability, but not absolute cell number. When testing the results with a microplate reader, in order to ensure the linearity of the experimental results, the MTT absorbance should be in the range of 0-0.7 as much as possible.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.