Конкретні кроки для вирощування клітин нирок хом’яка в колбах для культури клітин

Wed May 18 14:00:14 CST 2022

При культивуванні різних клітин колби для культури клітин є різновидом витратних матеріалів для культури клітин, які використовуються частіше. Вони в основному використовуються для культури прилиплих клітин, а специфікації коливаються від 25 мл до 225 мл. Середовище для культивування клітин нирки хом’яка буде використовувати цей витратний матеріал, а конкретні етапи його культивування є такими:

1. Підготовчі роботи до культури клітин:

1) Приготуйте середовище MEM; високоякісна фетальна бичача сироватка, 10%; подвійне антитіло 1%.

2) Умови культивування: Газова фаза: повітря, 95%; вуглекислий газ 5%. Температура: 37 градусів Цельсія, вологість інкубатора 70%-80%.

3) Розчин для заморожування: 90% сироватка, 10% ДМСО, готовий до використання.

2. Обробка клітин:

1) Відновлення кріоконсервованих клітин: швидко струсіть і розморозьте кріоконсервовану пробірку, що містить 1 мл суспензії клітин, на водяній бані при 37°C, додайте її в центрифужну пробірку, що містить 4-6 мл повного середовища, і перемішайте добре. Центрифугувати при 1000 об/хв протягом 3-5 хв, видалити супернатант і ресуспендувати клітини в повному середовищі. Потім суспензію клітин додавали в колбу для культури клітин, що містить 6-8 мл повного середовища, і культивували при 37°C протягом ночі. Ріст клітин і щільність клітин спостерігали під мікроскопом наступного дня.

2) Пасаж клітин: Якщо щільність клітин досягає 80%-90%, їх можна пересівати.

3) Кріоконсервація клітин: Після отримання клітин, рекомендується заморозити партію насіння клітин у перших 3 пасажах культури для подальших експериментів.

Вище наведено конкретні кроки для культивування клітин нирок хом’яка в колбах для культури клітин. Крім того, коли клітини кріоконсервуються, зберіть перетравлені клітини в центрифужну пробірку відповідно до процесу пасажу клітин і за допомогою гемоцитометра підрахуйте їх, щоб визначити щільність кріоконсервації клітин. Рекомендована щільність заморожування загальних клітин становить 1×106~1×107 життєздатних клітин/мл.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.