Застосування планшета з культурою клітин для виявлення МТТ

Wed May 18 13:57:44 CST 2022

планшет для клітинної культуриє своєрідним біологічним інструментом. За формою він поділяється на плоский і круглий. Кількість лунок включає 6 лунок, 12 лунок, 24 лунки, 48 ​​лунки, 96 лунок, 384 лунки тощо. В основному використовується для культури клітин, а також може використовуватися для вимірювання концентрації білка, 96-лункові планшети зазвичай використовуються для виявлення МТТ.

Метод МТТ, також відомий як колориметричний метод МТТ, є методом виявлення виживання та росту клітин. Принцип виявлення полягає в тому, що сукцинатдегідрогеназа в мітохондріях живих клітин може відновлювати екзогенний МТТ до нерозчинного у воді синьо-фіолетового кристала формазану (формазану) і відкладати його в клітинах, тоді як мертві клітини такої функції не мають. Диметилсульфоксид (ДМСО) може розчиняти формазан в клітинах, і його величина поглинання світла вимірюється при 570 нм за допомогою імуноферментного аналізу, який може опосередковано відображати кількість живих клітин. У певному діапазоні чисел клітин кількість утворення кристалів МТТ пропорційна кількості клітин. Етапи виявлення такі:

1. Культури клітин в 96-лунковий планшет для культури клітин. Після того, як щільність клітин буде відповідною, додайте 50 мкл МТТ до кожної лунки і продовжуйте культивування протягом 4 годин;

2. Відсмоктати культуральне середовище, що містить МТТ, і додати 150 мкл ДМСО. Вібруйте горизонтально протягом 10 хвилин, щоб повністю розчинити кристали. Для зважених клітин після центрифугування відсмоктують середовище, а потім додають ДМСО для розчинення;

3. Виміряйте поглинання при 550 нм на інструменті для імуноферментного аналізу (встановіть розумну контрольну групу та групу порожніх місць);

4. Коефіцієнт виживання клітин = величина поглинання дослідної групи/значення абсорбції контрольної групи*100%.

Під час операції слід зазначити, що МТТ є канцерогенним. Якщо можливо, спробуйте одягнути прозорі плівкові рукавички. Приготований МТТ повинен бути стерильним. МТТ дуже чутливий до бактерій. Не має значення, якщо ви додасте в 96-лунковий планшет для культури клітин, не захищаючи його від світла. , Адже часу мало, або ви можете вимкнути освітлення на консолі.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.