Виявлення активності клітин на клітинних фабриках - метод МТТ

Wed May 18 13:57:27 CST 2022

— це витратний матеріал, який часто використовується для культури клітин. Під час експерименту нам потрібно в реальному часі зрозуміти стан росту клітин і внести відповідні коригування відповідно до конкретної ситуації. Життєздатність клітин можна визначити за допомогою методу МТТ для визначення росту клітин.MTT метод, також відомий як колориметричний метод МТТ, є методом визначення виживання та росту клітин. Принцип виявлення полягає в тому, що сукцинатдегідрогеназа в мітохондріях живих клітин може відновлювати екзогенний МТТ до нерозчинного у воді синьо-фіолетового кристалічного формазану і відкладати в клітинах, тоді як мертві клітини такої функції не мають. Диметилсульфоксид (ДМСО) може розчиняти формазан в клітинах, а його величину поглинання світла можна виміряти за допомогою імуноферментного аналізу при довжині хвилі 570 нм, що може опосередковано відображати кількість живих клітин. У межах певного діапазону номерів осередків кількість утворення кристалів МТТ пропорційна числу комірки. Цей метод широко використовується при виявленні активності деяких біологічно активних факторів, широкомасштабному скринінгу протипухлинних препаратів, тесті на цитотоксичність і радіочутливості пухлини. Він характеризується високою чутливістю та економічністю.cell factory

Перед тестуванням життєздатності клітин на клітинній фабриці дуже важливим етапом є формулювання МТТ. Зазвичай концентрація МТТ у цьому методі становить 5 мг/мл. Таким чином, 0,5 г МТТ можна зважити, розчинити в 100 мл фосфатного буферного розчину (PBS) або середовища без фенольного червоного, відфільтрувати за допомогою фільтра 0,22 мкм для видалення бактерій у розчині та зберігати при 4°C у темряві. . . Під час приготування та зберігання намагайтеся обернути ємність алюмінієвою фольгою.

Використовуючи метод МТТ для вимірювання активності клітин на фабриці клітин, слід зазначити, що МТТ є канцерогенним, тому будьте обережні при його використанні. Цей метод можна використовувати лише для визначення відносного числа клітин і відносної життєздатності, але не абсолютного числа клітин. При перевірці результатів за допомогою зчитувача для мікропланшетів, щоб забезпечити лінійність експериментальних результатів, поглинання МТТ має бути в межах 0-0,7 якомога більше.

When using the MTT method to measure the cell activity in the cell factory, it should be noted that MTT is carcinogenic, so be careful when using it. This method can only be used to detect relative cell number and relative viability, but not absolute cell number. When testing the results with a microplate reader, in order to ensure the linearity of the experimental results, the MTT absorbance should be in the range of 0-0.7 as much as possible.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.