Dinamik Bir Model Kullanarak İnfluenza A Virüsü Enfeksiyonunun Süspansiyon MDCK Hücrelerinin Büyümesi ve Metabolizması Üzerindeki Etkisi

Thu May 19 08:59:47 CST 2022

Malzemeler ve Yöntemler

3.1. MDCK.SUS2 süspansiyon hücrelerinin ön kültürleri, 50 mL çalışma hacmi (wv) ile

(125 mL polikarbonat Erlenmeyer şişeleri, #431143, Corning®, New York City, NY, ABD) içinde büyütüldü. , bir Multitron Pro inkübatöründe (Infors HT, Bottmingen, İsviçre) 37 °C'de ve %5 CO2 atmosferinde 180 rpm sallama frekansıyla. Hücreler her 3-4 günde bir 0.5-0.8 x 106 hücre/mL tohumlama yoğunluğu ile pasajlandı.IAV A/Porto Riko/8/34 (H1N1) tohum virüsü enfeksiyon için kullanıldı, üretildi yapışık MDCK hücrelerinde (ECACC # 84121903). Tohum virüsü 1.1 x 109 TCID50/mL titresine sahipti. Süspansiyon MDCK hücrelerinin kültivasyonu için özel olarak geliştirilmiş mM piruvat [95].shaker flasks

Model doğrulaması için büyüme ve enfeksiyon deneyleri, 500 mL'lik çalkalama şişeleri (#4113-0500, Nalgene™, Thermo Scientific, Waltham, MA, ABD) 150 rpm'de 200 mL'lik bir başlangıç ​​yetiştirme hacmi ile. İki kültür, hücrelerin yaklaşık 200 saat büyüdüğü bir sahte enfeksiyon (Kültivasyon 1) ve hücrelerin aşılamadan yaklaşık 49 saat sonra IAV ile enfekte edildiği bir enfeksiyon (Kültivasyon 2) yapıldı. Hücre popülasyonunun senkronize bir enfeksiyonunu elde etmek için bir moi = 10 kullanıldı. Enfeksiyon sırasında nispeten düşük hücre konsantrasyonu (2.1 x 106 hücre/mL) ve kullanılan yüksek moi nedeniyle, ne ortam değiştirmesi ne de tripsin ilavesi (virüs aktivasyonu için) gerekli değildi. Her iki kültürde de, deney hidratlı olmayan bir inkübatörde yapıldığından, suyun buharlaşmasını (1-2 mL/gün) telafi etmek için numune almadan önce steril Milli-Q su ilave edildi.

Source from:

https:/ /www.mdpi.com/2218-1989/12/3/239/htm

Source from: https://www.mdpi.com/2218-1989/12/3/239/htm

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.