Dondurulmuş hücreler hücre kültürü şişelerine nasıl aktarılır

Thu May 19 08:59:34 CST 2022

Hücre kriyoprezervasyonu, uzun süreli depolama için hücre metabolizmasını azaltmak için hücreleri düşük sıcaklıklı bir ortama koyan bir tekniktir. Hücreleri korumaya ek olarak, bu teknoloji genellikle belirli hücreleri satın almak, hediye etmek, değiştirmek ve taşımak için kullanılır. Peki, dondurularak saklanan hücreleri hücre kültür şişelerine nasıl aktarabiliriz?

Bir sonraki operasyon gerçekleştirilmeden önce donmuş hücrelerin yeniden canlandırılması gerekir. Hücrelerin canlandırılması, hücrelerin canlılığının iyi korunabilmesi için hızlı olmalıdır. İşlem şu şekilde gerçekleştirilebilir:

1. Hücreleri aldıktan sonra dış ambalajın eksiksiz olup olmadığını kontrol edin; dış ambalajı açın ve kuru buzda saklanan hücreleri çıkarın;

2. Kriyoprezervasyon tüpünün hasar görüp görmediğini, içeriğin eriyip erimediğini kontrol edin ve çıkarılan kriyoprezervasyon tüpünü eritmek için hızlı bir şekilde 37℃ su banyosuna koyun;

3. Kriyoprezervasyon tüpü %75 alkol ile dezenfekte edilir ve biyolojik güvenlik kabinine konulur;

4. Kullanım için 15 ml santrifüj tüpüne 5 ml tam ortam ekleyin;

5 Kriyoprezervasyon tüpündeki hücre süspansiyonunu hazırlanan ortama ekleyin ve hafifçe karıştırın;

How to transfer cryopreserved cells to cell culture flasks

6. 15 mL santrifüj tüpünü santrifüje koyun ve 3-5 dakika boyunca 1000 rpm/dk (yaklaşık 200g) ile santrifüjleyin;

7. Kullanım için 25ml hücre kültürü şişesine 5ml tam ortam ekleyin;

8. Santrifüjlenmiş hücreleri çıkarın, alkolle sterilize edin ve güvenli bir kabine koyun;

9. Santrifüjlenmiş hücre süpernatanını nazikçe aspire edin, hücreleri yeniden süspanse etmek için 1 ml tam ortam ekleyin;

10. Yeniden süspanse edilen hücreleri hazırlanan hücre kültürü şişesine ekleyin ve nazikçe karıştırın;

11. Mikroskop altında aşılanmış hücrelerin durumunu ve yoğunluğunu gözlemleyin ve kültür şişesini kültür için 37°C'lik bir inkübatöre yerleştirin.

Hücre kurtarma sürecinde, hızlı füzyon hücre dışı kristallerin kısa sürede erimesini sağlayabilir. Suyun hücrelere nüfuz etmesine neden olan yavaş erime nedeniyle hücrelere zarar vermekten kaçının ve hücre içi yeniden kristalleşmeyi oluşturun. Kullanılan hücre kültürü şişeleri ve diğer sarf malzemeleri aseptik olmalıdır.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.