Hücre fabrikalarında hücrelerin aktivite tespiti - MTT yöntemi

Thu May 19 08:56:01 CST 2022

, genellikle yapışık hücre kültürü için kullanılan bir sarf malzemesidir. Deney sırasında, hücrelerin büyüme durumunu gerçek zamanlı olarak kavramamız ve belirli duruma göre ilgili ayarlamaları yapmamız gerekir. Hücre canlılığı, hücre büyümesini belirlemek için MTT yöntemi ile tespit edilebilir.MTT yöntemi, ayrıca MTT kolorimetrik yöntemi olarak da bilinir, hücre hayatta kalmasını ve büyümesini tespit etmek için bir yöntemdir. Tespit ilkesi, canlı hücrelerin mitokondrilerindeki süksinat dehidrojenazın, eksojen MTT'yi suda çözünmeyen mavi-mor kristalli formazana indirgeyebilmesi ve hücrelerde birikebilmesi, buna karşın ölü hücrelerin böyle bir işlevi olmamasıdır. Dimetil sülfoksit (DMSO), hücrelerde formazanı çözebilir ve ışık absorpsiyon değeri, canlı hücre sayısını dolaylı olarak yansıtabilen 570 nm dalga boyunda enzime bağlı immünosorbent deneyi ile ölçülebilir. Belirli bir hücre sayısı aralığında, MTT kristal oluşumunun miktarı hücre sayısıyla orantılıdır. Bu yöntem, bazı biyolojik olarak aktif faktörlerin aktivite tespiti, büyük ölçekli anti-tümör ilaç taraması, sitotoksisite testi ve tümör radyosensitivite analizinde yaygın olarak kullanılmaktadır. Yüksek hassasiyet ve ekonomi ile karakterizedir.hücre fabrikası

Hücre fabrikasındaki hücrelerin canlılığını test etmeden önce, MTT'nin formülasyonu çok önemli bir adımdır. Tipik olarak, bu yöntemdeki MTT konsantrasyonu 5 mg/ml'dir. Bu nedenle 0,5 g MTT tartılabilir, 100 ml fosfat tamponlu salin (PBS) veya fenol kırmızısı içermeyen ortamda çözülebilir, solüsyondaki bakterileri uzaklaştırmak için 0,22 µm filtre ile filtrelenebilir ve 4°C'de karanlıkta saklanabilir. . . Hazırlama ve saklama sırasında kabı alüminyum folyo ile sarmaya çalışın.

Hücre fabrikasındaki hücre aktivitesini ölçmek için MTT yöntemini kullanırken, MTT'nin kanserojen olduğu unutulmamalıdır, bu nedenle kullanırken dikkatli olun. Bu yöntem yalnızca nispi hücre sayısını ve nispi canlılığı tespit etmek için kullanılabilir, ancak mutlak hücre sayısını tespit etmek için kullanılamaz. Sonuçlar bir mikroplaka okuyucu ile test edilirken, deneysel sonuçların doğrusallığını sağlamak için MTT absorbansı mümkün olduğunca 0-0.7 aralığında olmalıdır.

When using the MTT method to measure the cell activity in the cell factory, it should be noted that MTT is carcinogenic, so be careful when using it. This method can only be used to detect relative cell number and relative viability, but not absolute cell number. When testing the results with a microplate reader, in order to ensure the linearity of the experimental results, the MTT absorbance should be in the range of 0-0.7 as much as possible.

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.