จะทำอย่างไรถ้าเซลล์ในแผ่นเพาะเลี้ยงเซลล์ไม่สม่ำเสมอ?

Thu May 19 10:06:14 CST 2022

แผ่นเพาะเลี้ยงเซลล์เป็นอุปกรณ์ที่ใช้สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ขนาดเล็ก เรามักพบกับปรากฏการณ์การรวมตัวของเซลล์และการกระจายที่ไม่สม่ำเสมอระหว่างการใช้งาน จะแก้ไขสถานการณ์นี้ได้อย่างไร?

เมื่อพบการกระจายตัวที่ไม่สม่ำเสมอของเซลล์ในเพลตการเพาะเลี้ยงเซลล์ ก่อนอื่นให้พิจารณาว่าเซลล์มีการผสมกันอย่างไร ไม่ว่าจะเป็นการปิเปตหรือการเขย่าเพลตการเพาะเลี้ยง หากเป็นอย่างหลังและสั่นเป็นวงกลม ก็น่าจะเกิดจากแรงเหวี่ยงหนีศูนย์กลาง เซลล์ถูกโยนไปที่ส่วนต่อพ่วง ส่งผลให้อยู่ตรงกลางเซลล์ได้ไม่ถึงสี่สัปดาห์ ก่อนเพาะเลี้ยงแผ่นเพาะ ให้ใส่จานเพาะเชื้อในตู้ฟักเป็นเวลาหลายชั่วโมงที่ความอิ่มตัวของสี แล้วนำออกมา เมื่อทำการเพาะเลี้ยงเซลล์ แรงควรจะเบา คุณสามารถใช้ดริปเปอร์ค่อยๆ เติมที่ด้านข้างของบ่อเพลทเพื่อให้สารแขวนลอยเซลล์ไหลในหลุมเพลต เพื่อให้เซลล์ที่เพาะเลี้ยงนั้นเติบโตอย่างเท่าเทียมกันโดยพื้นฐาน ห้ามใช้ออสซิลเลเตอร์ในการสั่น มิฉะนั้น เซลล์จะสะสม

ยิ่งเส้นผ่านศูนย์กลางของรูจานเพาะเลี้ยงเล็กลง ความไม่สม่ำเสมอของเซลล์ก็จะยิ่งชัดเจนมากขึ้น ปรากฏการณ์นี้พบได้บ่อยในเพลต 24 หลุม และ 96 หลุม เนื่องจากผนังของของเหลวทำให้อาหารเลี้ยงเชื้อในบ่อน้ำไม่ใช่ระนาบของเหลว และการใช้เพลตสองหลุมนี้เกิดจากความต้องการ นอกจากนี้ การแทรกแซงและเหตุผลอื่นๆ ไม่สามารถเพิ่มอาหารเลี้ยงเชื้อในปริมาณที่เพียงพอ เพื่อให้เซลล์ปรากฏเป็น "การรวบรวมขอบ" กับอาหารเลี้ยงเชื้อ หากจำนวนเซลล์ที่เพาะเลี้ยงเพิ่มขึ้นเพื่อให้เซลล์มีเนื้อเดียวกันตรงกลางบ่อ ต้องสังเกตตัวบ่งชี้อะไรบ้าง ถ้าเป็น MTT อิมมูโนฮิสโตเคมีจะส่งผลต่อผลลัพธ์เนื่องจากการแบ่งชั้นของเซลล์

เมื่อย่อย เซลล์ ให้ความสนใจกับการปิเปตเท่าๆ กันเพื่อหลีกเลี่ยงการรวมตัวของเซลล์ และปริมาณของอาหารเลี้ยงเชื้อในหลุมเพลตการเพาะเลี้ยงเซลล์ควรเพียงพอ โดยทั่วไป ให้เพิ่มอาหารเลี้ยงเชื้อให้เพียงพอในระหว่างการเพาะเชื้อ และเปลี่ยนอาหารหนึ่งครั้งเมื่อเพิ่มการแทรกแซง ปริมาณอาหารแทรกแซงบวกอาหารเลี้ยงเชื้อเท่ากับการเพาะเชื้อ ในกรณีนี้ ปรากฏการณ์ edge collection จะดีขึ้น

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.