วิธีวัดจำนวนเซลล์ที่มีชีวิตในโรงงานเซลล์

A cell factory เป็นโครงสร้างแบบชั้นเดียวหรือหลายชั้นของวัสดุสิ้นเปลืองสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ ในระหว่างกระบวนการเพาะเลี้ยงเซลล์ เราจำเป็นต้องเข้าใจสถานะการเติบโตของเซลล์ให้ทันเวลาก่อนที่จะดำเนินการในขั้นตอนต่อไป จำนวนเซลล์ที่มีชีวิตสามารถตรวจพบได้โดยการย้อมด้วยทรีแพนบลู วิธีการดำเนินการเฉพาะมีดังนี้:

1. สำหรับเซลล์ที่ยึดเกาะ ให้ดูดอาหาร เติมสารละลายย่อยอาหาร และย่อยในตู้ฟักไข่เป็นเวลาที่เหมาะสม หลังจากที่เซลล์กลายเป็นทรงกลม การย่อยอาหารสิ้นสุดลงโดยการเพิ่มปริมาตรของตัวกลางที่เท่ากันหรือมากกว่าปริมาตรของตัวกลางย่อย หลังจากการปั่นเหวี่ยง สารแขวนลอยของเซลล์ถูกสร้างขึ้นด้วยอาหารเลี้ยงเชื้อ;

2 ใช้สารละลาย trypan blue 0.5ml, PBS 0.3ml และสารแขวนลอยเซลล์ 0.2ml และผสมให้เข้ากัน จากนั้นทิ้งส่วนผสมไว้ 1-2 นาที ใช้ปิเปตเส้นเลือดฝอยหรือปิเปตทิปขนาดเล็ก 10ul เพื่อวาดส่วนผสมจำนวนเล็กน้อยและฉีดเข้าไปในฮีโมไซโตมิเตอร์;

3 นับอย่างน้อย 1,000 เซลล์และนับจำนวนเซลล์ที่ย้อมสี;

4. ล้างแผ่นนับและใบปิดด้วยน้ำบริสุทธิ์พิเศษและเอทานอล 75%;

5. เซลล์ปกติจะไม่ถูกย้อม หลังจากที่เซลล์ตายเท่านั้น การซึมผ่านของเยื่อหุ้มเซลล์จะมีขนาดใหญ่ขึ้น ทริปแพนสีน้ำเงินเข้าสู่เซลล์ และเซลล์จะปรากฏเป็นสีน้ำเงิน ไม่ควรวางส่วนผสมไว้นานเกินไป มิฉะนั้น เซลล์ที่มีชีวิตปกติจะใช้สีย้อมไปด้วย ซึ่งจะส่งผลต่อความแม่นยำในการนับ;

6 ความมีชีวิตของเซลล์ (%) = (จำนวนเซลล์ทั้งหมด - จำนวนเซลล์ที่ย้อมสี)/จำนวนเซลล์ทั้งหมด*100;

7 เช่นเดียวกับวิธีการนับเซลล์ การย้อมสี trypan blue มีข้อผิดพลาดมาก สามารถตรวจจับระดับการตายของเซลล์ตายได้ในระยะแรกเท่านั้น และไม่สามารถแสดงความแตกต่างระหว่างกลุ่มควบคุมและกลุ่มทดลองได้

ในกระบวนการเพาะเลี้ยงเซลล์ในโรงงานผลิตเซลล์ จะมีเซลล์บางเซลล์ที่ตายจากสาเหตุต่างๆ อยู่เสมอ การควบคุมจำนวนเซลล์ที่มีชีวิตและความมีชีวิตของเซลล์เป็นการดำเนินการหลักในการทดลองเพาะเลี้ยงเซลล์และเป็นวิธีที่มีประสิทธิภาพในการตรวจสอบความคืบหน้าของการทดลอง

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.