การผลิตไวรัสตับอักเสบซี Titer สูงในเครื่องปฏิกรณ์ชีวภาพความหนาแน่นเซลล์สูงแบบใช้ครั้งเดียวที่ปรับขนาดได้

Thu May 19 10:04:38 CST 2022

2. วัสดุและวิธีการ

2.1. การบำรุงรักษา Huh7.5 Cells

Huh7.5 การเพาะเลี้ยงเซลล์ได้รับการบำรุงรักษาใน การเพาะเลี้ยงเซลล์ T flasks ในตัวกลางที่มีซีรัม (SCM): Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) (Gibco, Paisley, UK) ที่มี GlutaMAX 4 mM และเสริมด้วย 10% fetal bovine serum (Sigma, St. Louis, MO, USA), 100 U/mL penicillin and 100 µg/mL streptomycin (Sigma) ในขวด T175 (Nunc, Roskilde, เดนมาร์ก) และขวดสำหรับเพาะเชื้อแบบสามชั้น (Nunc) เซลล์ Huh7.5 จะถูกส่งผ่านทุกๆ 2-3 วัน การเพาะเลี้ยงเซลล์ทั้งหมดถูกคงรักษาไว้ที่ 37 °C และ 5% CO2.

2.2 HCV Virus Stocks

สองสต็อกที่ยืนยันลำดับของยีน 5a recombinant SA13/JFH1core-NS5B [28] ซึ่งปลูกในการเพาะเลี้ยงเซลล์ Huh7.5 แบบโมโนเลเยอร์ในขวด T ถูกนำมาใช้ในการศึกษานี้ สต็อกไวรัสช่องที่สามที่มีระดับการติดเชื้อที่ 5.8 log10 FFU/mL ที่เติบโตภายใต้สภาวะที่มีซีรัม (SC) [39] ถูกใช้เพื่อสร้างเชื้อให้กับวัฒนธรรม CelCradle™ เขย่าขวดเพาะเชื้อ และสำหรับการทดลองกำหนดลักษณะไวรัส สต็อกไวรัสขั้นที่สี่ที่มีระดับการติดเชื้อ 5.1 log10 FFU/mL [32] ซึ่งเติบโตภายใต้เงื่อนไข SF [39] ถูกใช้สำหรับการทดลองจำแนกลักษณะไวรัส

แหล่งที่มาจาก: https://www.mdpi .com/2076-393X/10/2/249/htm

The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.

The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.

In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.

Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.

NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.

In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.