English
Subkultur hänvisar till processen att dela upp kulturen i små delar, återinokulera dem i ett annat odlingskärl (flaska) och sedan odla. Cellkulturflaskor är vanliga förbrukningsmaterial vid odling av celler. Så, hur subodlar man cellerna i kolven?
I allmänhet växer cellerna i cellodlingsflaskorna till ett tätt monolager och är i princip mättade. För att möjliggöra för cellerna att fortsätta att reproducera och utöka antalet celler är det nödvändigt att utföra passageoperationer. Suspenderade celler kan separeras direkt, medan vidhäftande celler måste smältas innan de kan separeras. Generellt används proteolytiska enzymer (såsom trypsin) för att smälta vidhäftande celler till enstaka celler. Etylendiamintetraättiksyra (EDTA) kan också tillsättas för att förbättra matsmältningen. Observera cellerna tills cellerna blir runda och lossnar från flaskväggen. Denna process tar ofta 5-15 minuter. För att undvika cellklumpar ska du inte knacka på cellodlingsflaskorna under processen att smälta cellerna. underlätta matsmältningen. Efter att cellerna separerats från flaskväggen, tillsätt omedelbart ett komplett medium som innehåller serum för att stoppa matsmältningen. Vissa proteiner i serumet kan hämma bukspottkörteln. Enzymaktivitet. I allmänhet är centrifugering inte nödvändig. Om cellerna kräver serumfritt eller lågserummedium, centrifugera vid 125 000 g i 5 minuter, kassera sedan det utgående mediet, tillsätt lämpligt nytt medium och blanda försiktigt cellerna före subodling.
Cellpassageförhållandet är vanligtvis 1:2 -1:20, beroende på celltyp. I processen att passera kommer trypsin att skada cellmembranet i vissa celler. Du kan använda en cellskrapa för att försiktigt skrapa cellerna, lägga till en lämplig mängd medium, försiktigt pipettera för att blanda cellerna och överföra dem till en ny odlingskolv.
The cell passaging ratio is generally 1:2-1:20, depending on the cell type. In the process of passaging, trypsin will damage the cell membrane of some cells. You can use a cell scraper to gently scrape the cells, add an appropriate amount of medium, gently pipette to mix the cells, and transfer them to a new culture flask.
The FAI climbed 5.9 percent year-on-year in the first 11 months of 2018, quickening from the 5.7-percent growth in Jan-Oct, the National Bureau of Statistics (NBS) said Friday in an online statement.
The key indicator of investment, dubbed a major growth driver, hit the bottom in August and has since started to rebound steadily.
In the face of emerging economic challenges home and abroad, China has stepped up efforts to stabilize investment, in particular rolling out measures to motivate private investors and channel funds into infrastructure.
Friday's data showed private investment, accounting for more than 60 percent of the total FAI, expanded by a brisk 8.7 percent.
NBS spokesperson Mao Shengyong said funds into weak economic links registered rapid increases as investment in environmental protection and agriculture jumped 42 percent and 12.5 percent respectively, much faster than the average.
In breakdown, investment in high-tech and equipment manufacturing remained vigorous with 16.1-percent and 11.6-percent increases respectively in the first 11 months. Infrastructure investment gained 3.7 percent, staying flat. Investment in property development rose 9.7 percent, also unchanged.